多重PCR联合毛细管电泳技术在骨感染病原菌及抗生素耐药基因检测中的评价研究

为解决骨科感染病原体检测耗时长、传统培养法漏检率高的问题，西安交通大学附属红会医院团队开展了一项回顾性研究，评估多重PCR联合毛细管电泳(mPCR-CE)技术的诊断效能。研究纳入1285份骨科样本，发现mPCR-CE与传统方法(RCM)总体符合率达81.32%，对MRSA和ESBLs等耐药基因的检出率显著优于培养法，可将检测时间从77.88小时缩短至4-6小时，为临床快速精准抗感染治疗提供了新选择。

骨科感染一直是临床治疗的难题，从简单的伤口感染到复杂的假体周围感染，这些疾病往往病程漫长、复发率高，甚至可能导致治疗失败和骨不连。更令人担忧的是，传统微生物培养方法需要3-5天才能出结果，而在此期间医生只能凭经验使用抗生素，这不仅增加了细菌耐药风险，也给患者带来沉重的经济负担。在这样的背景下，寻找一种快速、准确的病原体检测方法成为临床迫切需求。

西安交通大学附属红会医院的研究团队在《BMC Infectious Diseases》发表了一项创新性研究，他们系统评估了多重PCR联合毛细管电泳(mPCR-CE)技术在骨科感染诊断中的应用价值。这项研究针对传统培养法(RCM)的局限性，探索了一种能在4-6小时内完成病原体鉴定和耐药基因检测的新方法，为临床抗感染治疗提供了有力武器。

研究采用了回顾性队列设计，纳入了2023年5月至11月期间739名骨科患者的1285份样本，包括穿刺液、关节液、假体组织等多种类型。关键技术方法包括：1) 使用自动化核酸提取仪进行DNA提取；2) 采用可同时检测45种细菌、7种真菌、3种非典型菌和9种耐药基因的多重PCR体系；3) 通过毛细管电泳平台实现快速检测；4) 以传统培养和药敏试验作为金标准进行比对验证。

研究结果部分，"基本患者数据"显示，患者中位年龄57岁，以创伤(35%)和脊柱疾病(26.7%)为主，合并糖尿病(10.6%)等基础疾病可能增加感染风险。"菌株分布与主要致病菌"部分发现，mPCR-CE的总检出率(35.91%)显著高于RCM(29.87%)，尤其对无菌体液如脑脊液的检出率从5.56%提升至22.22%。"回顾性研究组总体一致性"数据显示，两种方法总体符合率达81.32%，其中mPCR-CE对多重耐药菌的检测优势明显，如MRSA检出率(29.10%)远超培养法(4.85%)。

"耐药性分布"部分特别值得关注，mPCR-CE对9种耐药基因的检测率(54.85%)是培养法(19.4%)的2.8倍，尤其对mecA(MRSA标志基因)和CTX-M(ESBLs标志基因)的检测更为敏感。"病例分析"中，一例膝关节假体感染患者经mPCR-CE快速检出烟曲霉，而培养结果为阴性，充分展现了该技术对已使用抗生素患者的诊断价值。

在讨论部分，研究者指出mPCR-CE具有三大临床优势：一是检测速度快，将平均报告时间从77.88小时缩短至6小时；二是覆盖范围广，能检测难培养的厌氧菌、非典型病原体及耐药基因；三是灵敏度高，对使用抗生素后的样本仍保持良好检出率。不过该技术也存在局限性，如不能定量检测细菌载量，对生物膜相关病原体的检测谱有待扩展。

这项研究的临床意义重大，为骨科感染提供了全新的诊断路径。特别是在我国抗生素耐药形势严峻的背景下，mPCR-CE技术能帮助医生快速锁定病原体和耐药机制，实现精准用药。研究团队建议将该技术作为筛查工具，与培养法互补使用，共同提高感染诊疗水平。未来需要更多前瞻性研究来验证其在指导治疗、改善预后方面的实际价值，并不断优化检测靶标以适应临床需求。