### 1. 引言
1.1 对脑可利用治疗药物的需求
中枢神经系统（CNS）在传统小分子药物研发中的失败率高达 80 - 100%，这使得制药行业对 CNS 研究的投入减少。不过，借助先进的生物信息学和基因组工具，基于肽的治疗药物研究正在兴起。通过鼻脑（N - to - B）的鼻腔给药（IN）方式，可改善肽类药物在 CNS 的递送效果。
1.2 蛋白质还原论方法：ADNP/NAP
将大蛋白切割成小的活性肽片段，能保留关键生物活性，还可增强稳定性、特异性和脑内可用性。NAP（单氨基酸代码：NAPVSIPQ），即达武奈肽（AL - 108，CP201），是活性依赖性神经保护蛋白（ADNP）的有效片段，在极低浓度下就有显著神经保护作用。达武奈肽对患有进行性核上性麻痹（PSP）的女性疗效显著，还能改善遗忘型轻度认知障碍（MCI，AD 前驱症状）患者的记忆。
1.3 VIP/PACAP，昼夜节律的关键调节因子，控制 ADNP
ADNP 受血管活性肠肽（VIP）及其结构相关肽垂体腺苷酸环化酶激活肽（PACAP）调节。VIP 和 PACAP 是昼夜节律的主要调节者，VIP 能维持昼夜节律，PACAP 则在光信号通路中发挥重要作用。VIP 可增强 ADNP 的产生和分泌，影响 ADNP 基因表达，而 ADNP 对大脑发育和功能至关重要，其基因突变与 tau 病变和 AD 相关。
1.4 关注脑部疾病中的昼夜节律，以 AD 为例
AD 患者的昼夜节律明显紊乱。昼夜节律系统由输入、振荡器和输出三部分组成，分子水平上由一组时钟基因控制，形成转录 - 翻译反馈环（TTFL）。昼夜节律紊乱会导致多种生理功能障碍，与脑部疾病的发生和发展密切相关，如睡眠障碍、抑郁症等。AD 患者的昼夜节律紊乱比正常衰老更严重，干预昼夜节律可能改善 AD 症状并减缓疾病进展。
2. ADNP 在神经发育、神经保护和 tau 病变中的作用概述，及其衍生物 NAP（达武奈肽）的治疗潜力
ADNP 分子量为 123.56 kDa，在全身广泛表达，对大脑形成至关重要，它能调节 400 多个与器官发育、认知和运动功能相关的基因。ADNP 基因突变会导致 tau 病变、认知缺陷或智力障碍，人类 ADNP 基因致病性变异会引发 ADNP 综合征。ADNP 参与染色质重塑，调节 RNA 转录和剪接，还与微管相关蛋白 Tau、β - 连环蛋白、微管末端结合蛋白（EB1 和 EB3）等相互作用，保护神经元免受 Tau 相关病理影响。此外，ADNP 与 Sirtuin 1（SIRT1）相互作用，调节自噬和线粒体保护，其基因表达存在性别差异。在早期 AD 血清样本中，ADNP 是唯一显著减少的蛋白质，且与认知表现相关。由于 ADNP 是大蛋白，脑部递送困难，因此开发了小肽治疗药物 NAP（达武奈肽）。NAP 通过鼻腔喷雾给药，具有神经保护和神经可塑性作用，能增强微管稳定性，减少 Tau 过度磷酸化，促进神经突生长和突触可塑性，在多种疾病模型中展现出治疗潜力。
3. NAP（达武奈肽）的细胞递送和体外疗效：作用机制和治疗潜力
NAP（达武奈肽）能有效穿透细胞膜，通过动力蛋白相关的内吞作用进入细胞，在细胞质和细胞核中快速分布。在多种细胞实验中，NAP 可增强树突棘可塑性、促进细胞存活、增强微管动力学、保护细胞免受 tau 病变影响。它还能增强 EB1/EB3 与 Tau 在微管上的相互作用，调节 SIRT1 与 EB1/EB3 的相互作用，纠正 ADNP 致病突变细胞的核质边界破坏。此外，NAP 与多种蛋白相互作用，调节细胞骨架、Wnt 信号通路、转录控制等，在治疗 ADNP 相关疾病和 tau 病变方面具有很大潜力。
4. NAP（达武奈肽）的脑部递送和体内研究：功能结果和行为纠正
鼻腔给药时，NAP 具有出色的生物利用度，能通过全身循环高效递送至 CNS。不同的配方会影响 NAP 的生物利用度，新型氯丁醇载体可提高其脑内生物利用度。人体研究中，NAP 的鼻腔给药配方稳定且溶解性良好。在动物模型中，NAP 能改善 ADNP 缺陷小鼠的多种发育和行为缺陷，增强认知和运动功能，调节基因表达，纠正肠道微生物群变化，对多种神经发育和退行性疾病模型均有治疗效果，突显其在神经保护方面的重要作用。
5. 达武奈肽的临床应用经验
达武奈肽的临床研究表明，其在成人中安全性和耐受性良好，主要副作用为轻微的鼻腔不适。在精神分裂症患者中，达武奈肽对日常生活功能有一定改善；在 PSP 患者中，性别特异性分析显示，它能显著减缓女性患者的疾病进展，对女性患者的脑室体积、日常活动能力和神经功能有保护作用；在 AD 的前驱症状 aMCI 患者中，达武奈肽有潜在的认知保护作用，且存在性别差异，男性在视觉记忆测试中表现更好，女性则在言语记忆和注意力测试中从高剂量中获益更多。
6. NAP（达武奈肽）促进 ADNP 替代 / 增强疗法：概述
NAP 虽只占 ADNP 的约 0.7%，但能补偿 ADNP 的缺陷。在体外和体内实验中，NAP 和 ADNP 都能提供神经保护，且 NAP 在低浓度下就有高效的神经保护作用，能改善多种 ADNP 缺陷相关症状，还能增加内源性 ADNP 的表达，其保护作用因剂量、疾病和性别而异，在多种疾病的临床治疗中展现出潜力。
7. 昼夜节律调节、tau 病变与 ADNP 的联系
昼夜节律调节与 tau 病变之间存在复杂的双向关系。睡眠模式紊乱与痴呆风险增加及相关生物标志物有关，不同 tau 病变的睡眠 - 觉醒调节和昼夜节律存在明显功能障碍，如 PSP 患者的睡眠特征与其他神经退行性疾病不同，AD 患者则有夜间觉醒增加等表现。Tau 相关的神经退行性变会影响视交叉上核（SCN），破坏分子时钟，导致昼夜节律失调。此外，AD 患者的 SCN 神经元数量减少，VIP 和 PACAP 与 ADNP 功能密切相关，而达武奈肽在调节昼夜节律和改善 tau 病变方面具有潜在应用价值。
8. tau 病变与血脑屏障：与性别的进一步关联
tau 病变存在性别特异性的易感性差异，女性在关键脑区的神经原纤维缠结更明显，Tau 生物标志物水平更高，认知衰退和脑萎缩出现更早，这与多种生物学和激素因素有关。血脑屏障（BBB）的完整性对 AD 病理十分关键，tau 病变会导致 BBB 功能障碍，而 BBB 的通透性又受神经炎症和激素的影响，性别差异在其中起到重要作用。雌激素对 BBB 有保护作用，不同性别在 BBB 通透性和认知功能方面存在差异，这些发现为制定针对性的治疗策略提供了依据。
9. 鼻腔肽递送和中枢神经系统靶向的现代方法
药物递送进入 CNS 面临着血脑屏障的阻碍，鼻腔给药可绕过血脑屏障。鼻腔给药的化合物通过鼻腔嗅上皮的解剖间隙，经嗅觉和三叉神经通路到达大脑。纳米技术可增强生物分子的运输，如用乳铁蛋白修饰纳米颗粒能提高药物向大脑的运输效率。此外，利用减毒的弓形虫递送治疗蛋白是一种创新方法，它能绕过血脑屏障，将蛋白直接递送到宿主细胞胞质中，但还需进一步优化。
10. 结论
鼻腔给予达武奈肽是一种有前景的神经保护治疗方法，在调节微管动力学、增强突触功能和纠正行为及生理表型方面效果显著，且安全性良好、生物利用度高。临床研究表明，应重视性别特异性分析，未来研究应纳入不同性别的受试者，考虑激素状态的影响，并进行剂量范围研究。达武奈肽作为受 VIP 和 PACAP 调节的 ADNP 片段，在调节昼夜节律方面具有潜力，现代递送方法有望进一步提升其治疗效果，为神经保护领域带来新的希望。
生物通微信公众号
