创伤性脑损伤（Traumatic Brain Injury，TBI）就像一颗隐藏在生活中的 “定时炸弹”，随时可能引爆，给人们的健康带来沉重打击。在我国，随着交通事故和老年人跌倒事件的增多，TBI 的发病率呈上升趋势，而在一些冲突地区，因枪伤导致的 TBI 也屡见不鲜。TBI 不仅会给患者带来身体上的痛苦，还会造成巨大的经济负担，尤其是在医疗资源有限的中低收入国家。
TBI 发生后，初始的机械力伤害会引发缺氧、出血和细胞损伤等问题，而后续的炎症和氧化应激反应更是雪上加霜，会进一步加重中枢神经系统（CNS）的损伤。其中，神经炎症在 TBI 的二次损伤中扮演着关键角色。受伤的神经元会释放各种危险信号，激活小胶质细胞和星形胶质细胞，引发炎症级联反应。小胶质细胞作为中枢神经系统的主要免疫细胞，在 TBI 后的炎症反应中起着重要作用。它就像一把双刃剑，在损伤初期，能发挥一定的保护作用，调节炎症反应、释放抗炎因子；但随着 TBI 的发展，它可能会过度激活，转变为促炎表型（M1），释放大量促炎细胞因子，如肿瘤坏死因子 -α（TNF-α）、白细胞介素 - 1β（IL-1β）和白细胞介素 - 6（IL-6）等，这些因子会通过兴奋性毒性过程加重神经元损伤，持续破坏周围健康的脑组织，使得神经炎症反应不断放大。
近年来，触发受体表达于髓样细胞 2（Triggering Receptor Expressed on Myeloid Cells 2，TREM2）成为了研究的热点。它是一种主要存在于小胶质细胞和髓样细胞上的单向跨膜受体，在调节神经炎症、吞噬作用和组织修复等方面发挥着重要作用。在 TBI、蛛网膜下腔出血（SAH）、缺血性中风和阿尔茨海默病等疾病模型中，都能看到 TREM2 的身影，它的激活可以减轻神经炎症，促进组织修复；相反，缺乏 TREM2 则会阻碍小胶质细胞的吞噬能力，加重脑损伤和炎症。
4,4′- 二甲氧基查尔酮（4,4’-Dimethoxychalcone，DMC）是一种黄酮类化合物，因其具有清除自由基、抗炎、抗衰老和抑制肿瘤生长等特性而受到广泛关注。在帕金森病模型中，DMC 已被证明具有显著的抗炎作用，还能保护多巴胺能神经元。然而，DMC 在 TBI 方面的研究却非常有限。
为了探索 DMC 在 TBI 治疗中的潜力，皖南医学院第一附属医院（弋矶山医院）等机构的研究人员开展了一系列研究。他们的研究成果发表在《Inflammation》杂志上，为 TBI 的治疗带来了新的希望。
研究人员采用了多种关键技术方法来开展这项研究。在细胞实验方面，培养了 BV2 小鼠小胶质细胞系，用于探究 DMC 对细胞的作用；在动物实验中，选用 8 - 9 周龄的雄性 C57BL/6 小鼠，通过流体冲击伤（Fluid Percussion Injury，FPI）方法建立了中度 TBI 小鼠模型。同时，运用了细胞活力检测（CCK-8）、定量实时聚合酶链反应（qRT-PCR）、蛋白质免疫印迹（Western blot）、酶联免疫吸附测定（ELISA）、免疫组织化学、免疫荧光等技术，对基因和蛋白质表达水平进行定量分析。此外，还借助网络药理学预测 DMC 的潜在靶点，并进行基因本体（Gene Ontology，GO）分析和京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）通路富集分析，预测受 DMC 影响的信号通路 。
下面来看具体的研究结果：
- DMC 改善创伤性脑损伤后的神经功能障碍：通过 Morris 水迷宫实验评估发现，DMC 治疗组小鼠在学习和记忆能力方面明显优于 TBI 组。在学习阶段，DMC 治疗组找到平台的时间更短；在记忆评估阶段，该组在目标区域停留的时间更长，总游泳距离和穿越平台的频率也显著增加。同时，改良神经功能缺损评分（mNSS）显示，DMC 治疗的小鼠神经功能改善程度明显大于 TBI 组的自发恢复情况。此外，测量脑水含量发现，DMC 治疗组脑水肿明显减轻，表明 DMC 能减少二次损伤，加速 TBI 后的恢复。
- DMC 抑制体外 BV2 小胶质细胞的激活和炎症标志物的产生：以脂多糖（LPS）刺激 BV2 小胶质细胞模拟 TBI 的炎症反应，通过 CCK-8 实验确定了 LPS 和 DMC 的合适浓度。结果显示，DMC 能减轻 LPS 诱导的 BV2 细胞形态变化，抑制小胶质细胞的激活，并且显著降低细胞培养上清液中促炎细胞因子 IL-1β 的水平，表明 DMC 在体外能有效抑制 LPS 诱导的炎症反应。
- DMC 减轻体内小胶质细胞的激活和炎症标志物的产生：在体内实验中，通过苏木精 - 伊红（HE）染色发现，DMC 能显著减少 TBI 后的出血情况，促进组织恢复。免疫组织化学和免疫荧光染色结果表明，DMC 治疗后，小胶质细胞标记物 Iba-1 阳性细胞数量明显减少，同时炎症相关因子 NF-κB、IL-1β 和 TNF-α 的 mRNA 水平以及 TNF-α 的蛋白水平也显著降低，说明 DMC 在体内同样能抑制小胶质细胞的激活，减轻炎症反应。
- DMC 调节小胶质细胞中 TREM2 受体的表达：通过蛋白质免疫印迹和免疫荧光共染色发现，TBI 后 TREM2 蛋白表达显著上调，而 DMC 治疗能明显降低其表达水平。免疫荧光共染色还证实 TREM2 主要存在于小胶质细胞中，且 DMC 治疗可减少 TREM2 在小胶质细胞中的共定位，表明 DMC 不仅能降低小胶质细胞上 TREM2 的总体水平，还能抑制其激活，从而减轻 TBI 引发的炎症反应。
- DMC 改善 TBI 诱导的神经元凋亡：Nissl 染色和免疫荧光染色结果显示，TBI 后神经元数量明显减少，而 DMC 治疗能显著增加神经元数量，改善 Nissl 体的恢复情况。同时，蛋白质免疫印迹分析发现，DMC 能降低促凋亡蛋白 Bax 的表达，提高抗凋亡蛋白 Bcl-2 的表达，降低 Bax/Bcl-2 比值。TUNEL 染色结果也表明，DMC 能显著减少 TBI 诱导的神经元凋亡，发挥神经保护作用。
- DMC 通过 TREM2/PI3K/AKT/NF-κB 通路发挥作用：利用网络药理学预测 DMC 的作用机制，发现其可能通过 PI3K/AKT 通路发挥对 TBI 的治疗作用。蛋白质免疫印迹分析进一步证实，TBI 后 AKT、PI3K 和 NF-κB 的磷酸化形式以及 IL-1β 水平显著增加，而 DMC 给药能显著降低这些磷酸化蛋白和 IL-1β 的浓度，表明 DMC 通过降低 TREM2 表达，抑制 AKT、PI3K 和 NF-κB 的磷酸化，减轻炎症通路的过度激活，发挥对 TBI 的治疗作用。
综上所述，研究结论表明 DMC 在 TBI 治疗中展现出巨大的潜力。它能有效抑制小胶质细胞的过度激活，减轻神经炎症，减少神经元凋亡，改善 TBI 导致的学习和记忆功能障碍，其作用机制可能与调节 TREM2/PI3K/AKT/NF-κB 信号通路有关。这一研究为 TBI 的治疗提供了新的治疗靶点和机制，为未来 TBI 的临床治疗开辟了新的方向。不过，研究也存在一定的局限性，比如仅探讨了 DMC 对小胶质细胞的影响，未涉及其他细胞类型；DMC 下调 TREM2 表达的具体机制尚不明确等，这些都需要后续进一步深入研究 。但无论如何，这项研究为 TBI 患者带来了新的希望，有望在未来改善患者的预后和生活质量。
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