适配器CAR共表达策略有效克服淋巴瘤单/双抗原逃逸并维持CAR-T细胞疗效

为解决CAR-T细胞疗法因抗原逃逸导致的疗效减弱问题，研究人员开展适配器CAR与常规CAR共表达（ConvAD CAR-T）的主题研究，证实该平台通过双模靶向机制在体外和体内实验中有效抑制ROR1、CD19、CD20阳性淋巴瘤的生长，且优于单特异性和双特异性CAR-T细胞，为克服肿瘤抗原逃逸提供了创新性解决方案。

嵌合抗原受体（CAR）T细胞疗法在B细胞恶性肿瘤治疗中展现出显著疗效，但肿瘤细胞通过下调或丢失靶抗原（即抗原逃逸）产生治疗抵抗，成为临床上面临的主要挑战之一。当CD19阳性肿瘤细胞丢失该抗原后，会导致针对CD19的CAR-T细胞治疗失效，疾病复发。因此，开发能够同时靶向多个抗原、有效应对抗原逃逸的新型CAR-T技术迫在眉睫。

为了应对这一难题，由Zeno Riester、Marlena Surowka等来自德国维尔茨堡大学医院的研究团队在《Molecular Therapy》上发表了一项创新性研究。他们设计并构建了一种名为ConvAD CAR的新型T细胞平台。该平台的核心在于T细胞同时表达两种CAR：一种是传统的、针对特定肿瘤抗原（如ROR1）的常规CAR（conventional CAR）；另一种是适配器CAR（adapter CAR），它能够通过识别经过Fc段突变（P329G）的抗体来灵活地结合不同的肿瘤抗原。这种设计使ConvAD CAR-T细胞具备了双重攻击能力：既可以通过常规CAR直接识别并攻击表达原定靶抗原的肿瘤细胞，又可以在肿瘤细胞发生抗原逃逸时，通过注射相应的适配器抗体（例如针对CD19或CD20的抗体），重新引导T细胞攻击新的靶点，从而实现多抗原靶向和动态调整的治疗策略。

研究人员为验证ConvAD CAR-T细胞的有效性，运用了多项关键技术方法。研究涉及体外细胞培养实验，使用表达不同抗原组合的淋巴瘤细胞系，评估CAR-T细胞的细胞因子释放、增殖和细胞毒性能力。关键的体内实验则采用了免疫缺陷小鼠模型，通过植入人源淋巴瘤细胞（包括稳定表达抗原以及模拟单抗原或双抗原丢失的模型）来评估ConvAD CAR-T细胞抑制肿瘤生长的效果，并与单一靶点CAR-T和双特异性CAR-T进行对比。此外，研究还利用了流式细胞术分析CAR-T细胞的表型和激活状态，并通过免疫荧光显微镜等技术观察细胞间相互作用。所有实验均包含严格的对照组以确保结果的可靠性。

ConvAD CAR T cells display robust bimodal activity

研究人员首先在体外验证了ConvAD CAR-T细胞的双模活性。结果表明，当存在ROR1阳性靶细胞时，表达抗ROR1常规CAR的ConvAD CAR-T细胞能够被有效激活，发挥强大的细胞杀伤作用并释放干扰素-γ（IFN-γ）等细胞因子。更重要的是，当向体系中加入针对CD19或CD20的Fc突变适配器抗体时，即使在没有ROR1抗原的情况下，ConvAD CAR-T细胞也能通过适配器CAR途径被有效激活，并对CD19或CD20阳性靶细胞产生强烈的应答。这证明了ConvAD平台能够同时利用两种独立的信号通路靶向肿瘤。

ConvAD CAR T cells prevent lymphoma outgrowth in vivo following single antigen loss

在模拟单抗原逃逸的淋巴瘤小鼠模型中，研究人员观察到，传统的单一靶点CAR-T细胞（如仅靶向CD19）在肿瘤细胞丢失CD19抗原后，无法控制肿瘤生长。相比之下，ConvAD CAR-T细胞（例如，同时表达抗CD19常规CAR和适配器CAR）在注射CD20适配器抗体后，即使肿瘤细胞丢失了CD19，也能通过适配器CAR介导的对CD20的识别，有效清除肿瘤，显著延长小鼠的生存期。这证实了ConvAD平台能够有效应对临床常见的单抗原逃逸 scenario。

ConvAD CAR T cells control dual antigen escape in vivo

研究进一步挑战了更严峻的双抗原逃逸模型。在此模型中，淋巴瘤细胞同时丢失了两个主要的靶抗原（如CD19和CD20）。结果发现，ConvAD CAR-T细胞（其常规CAR靶向ROR1，并共表达适配器CAR）在注射针对第三个靶点（如CD22）的适配器抗体后，依然能够有效抑制肿瘤的生长。而传统的双特异性CAR-T细胞（同时靶向CD19和CD20）在此模型下则完全失效。这一结果凸显了ConvAD平台在应对复杂抗原逃逸方面的巨大灵活性和优势。

The ConvAD platform benchmarks superior to bispecific CAR T cells

在整个研究过程中，研究人员将ConvAD CAR-T细胞与单一靶点CAR-T细胞以及双特异性CAR-T细胞进行了系统性的比较。结果表明，无论是在体外杀伤实验还是体内肿瘤模型（包括稳定抗原表达、单抗原丢失和双抗原丢失）中，ConvAD CAR-T细胞均表现出同等或更优的抗肿瘤效果。其优越性主要体现在多功能性、灵活性和应对抗原丢失的稳健性上。

综上所述，该项研究得出结论：ConvAD CAR-T细胞平台通过共表达常规CAR和适配器CAR，成功实现了双模、可重定向的抗肿瘤活性。该平台能够在体外和体内有效对抗表达原定靶抗原的淋巴瘤，并且在发生单抗原甚至双抗原逃逸时，通过适配器抗体灵活切换靶点，持续发挥强大的肿瘤清除作用，其性能优于现有的单靶点和双特异性CAR-T策略。这项研究的重大意义在于，它为解决CAR-T疗法中的核心挑战——抗原逃逸，提供了一种极具前景的创新性策略。ConvAD平台不仅增强了治疗的有效性和持久性，其模块化设计还为未来快速扩展靶向谱、个性化组合不同适配器抗体以应对不断演变的肿瘤提供了可能，标志着CAR-T疗法向更智能化、精准化迈出了重要一步。