综述：新抗原和肿瘤突变负荷在癌症免疫治疗中的作用：进展、机制和展望

这篇综述深入探讨了新抗原（neoantigens）和肿瘤突变负荷（TMB）作为癌症免疫治疗关键生物标志物的最新进展。文章系统阐述了二者在预测免疫检查点抑制剂（ICI）疗效、指导个性化疫苗设计中的协同作用，并创新性提出肿瘤新抗原负荷（TNB）概念。通过整合高通量测序（NGS）、质谱免疫肽组学（MS）和生物信息学工具，作者揭示了从突变识别到T细胞激活的全链条机制，为克服肿瘤微环境（TME）免疫抑制提供了多模态联合治疗新策略。

新抗原与TMB：定义、相互关系及评估

新抗原源自肿瘤特异性体细胞突变产生的"非我"肽段，通过主要组织相容性复合体（MHC）呈递激活T细胞免疫应答。而TMB量化肿瘤基因组非同义突变总数，作为新抗原潜力的替代指标。二者形成互补关系：TMB提供全局突变景观，新抗原则聚焦功能性免疫靶点。最新技术如全外显子测序（WES）结合NetMHCpan算法可预测MHC结合亲和力，质谱免疫肽组学直接鉴定肿瘤表面呈递肽段，使新抗原预测准确率显著提升。临床应用中，FDA已批准TMB≥10 mut/Mb作为帕博利珠单抗治疗的泛癌种生物标志物。

新抗原在癌症免疫治疗中的进展

机制研究揭示，新抗原-MHC复合物被T细胞受体（TCR）识别后，CD8⁺细胞毒性T细胞（CTL）通过穿孔素-颗粒酶途径诱导肿瘤凋亡，CD4⁺辅助T细胞分泌细胞因子增强应答。但T细胞耗竭（表达PD-1/CTLA-4等抑制受体）和抗原呈递缺陷（如β2微球蛋白/B2M丢失）导致免疫逃逸。临床突破体现在：①mRNA-4157疫苗联合帕博利珠单抗使黑色素瘤复发风险降低44%；②胰腺癌中个性化RNA疫苗激发持续1.9年的T细胞应答；③EGFRvIII靶向CAR-T在胶质瘤中实现抗原清除。值得注意的是，新抗原质量（MHC结合力/与野生型差异度）比数量更能预测免疫原性。

TMB在癌症免疫治疗中的应用

TMB预测价值取决于四大机制支柱：突变产生新抗原概率、MHC呈递效率、TCR识别可能性和宿主免疫状态。高TMB肿瘤（如dMMR/POLD1突变型）因移码突变产生强免疫原性新抗原，但需克服TME中调节性T细胞（Treg）和髓系抑制细胞（MDSC）的抑制作用。液体活检技术突破实现血液TMB（bTMB）动态监测，GuardantOMNI等panel可检测0.5%低频突变。KEYNOTE-158试验证实TMB≥10 mut/Mb患者客观缓解率达29%，与PD-L1联用可进一步提升预测准确性。空间转录组技术揭示突变热点与免疫排斥区的空间关联，推动精准分型。

挑战与展望

当前面临三大瓶颈：①肿瘤异质性导致亚克隆新抗原逃逸；②HLA多态性限制公共新抗原应用；③制造工艺延迟个性化治疗推广。前沿解决方案包括：机器学习模型整合免疫肽组数据预测TCR识别概率；放疗/化疗诱导免疫原性细胞死亡增强新抗原暴露；溶瘤病毒（如T-VEC）重塑"冷肿瘤"微环境。未来需建立标准化TMB检测流程，开发HLA超型覆盖疫苗，并通过单细胞测序解析克隆进化轨迹。这些突破将推动新抗原/TMB从预测标志物转化为治疗靶标，最终实现真正意义上的精准免疫治疗。