超灵敏 ctDNA 检测：早期肺腺癌术前精准分层的新希望

循环肿瘤 DNA（ctDNA）检测对早期肿瘤临床风险预测意义重大，但现有临床验证方法的敏感性限制了其应用。研究人员利用 NeXT Personal 平台开展早期肺腺癌术前 ctDNA 检测研究，发现该平台能提升检测率，预测临床结局，为疾病分层提供新途径。

在癌症治疗领域，精准评估早期肿瘤患者的临床风险，对于制定个性化治疗方案、提高治愈率至关重要。循环肿瘤 DNA（ctDNA）检测作为一种极具潜力的手段，有望实现这一目标。ctDNA 是源自肿瘤的游离 DNA，术前 ctDNA 状态可作为生物标志物，术后检测能指导辅助治疗方案选择，随访时监测分子残留疾病（MRD）还可早于常规临床监测发现癌症复发。然而，当前临床应用中，ctDNA 检测却面临着重重困境。由于血浆中 ctDNA 水平极低，常低于 100 ppm，加上非恶性细胞产生的游离 DNA（cfDNA）变异、测序误差以及不确定潜能的克隆性造血（CHIP）产生的变异干扰，使得术前 ctDNA 检测难度极大。此外，现有 ctDNA 检测方法的敏感性不足，无法准确检测出低水平的 ctDNA，导致部分患者的病情无法得到准确评估，进而影响治疗决策。

为了解决这些问题，来自英国伦敦大学学院癌症研究所、弗朗西斯・克里克研究所以及美国 Personalis Inc. 等机构的研究人员开展了一项重要研究。他们利用一种名为 NeXT Personal 的超灵敏、肿瘤知情的液体活检平台，对 171 例来自 TRACERx 研究的早期肺癌患者进行术前 ctDNA 检测分析，相关研究成果发表在《Nature Medicine》上。

研究人员在研究过程中主要运用了以下几种关键技术方法：首先，对肿瘤和正常样本进行全基因组测序（WGS），以获取肿瘤相关的基因信息；接着，利用专有算法设计 NeXT Personal 探针面板，从大量体细胞变异中筛选出用于检测 ctDNA 的靶点；然后，对血浆样本进行 cfDNA 文库制备、靶标富集和测序；最后，通过特定的数据分析流程，包括序列比对、噪声抑制和 ctDNA 检测，确定 ctDNA 水平和检测状态。研究使用的样本来自 TRACERx 研究队列，该队列包含不同分期的非小细胞肺癌（NSCLC）患者。

高灵敏度检测术前 ctDNA

研究人员使用 NeXT Personal 平台对 171 例患者的血浆样本进行分析，其中 94 例为肺腺癌（LUAD）患者，77 例为非 LUAD 的 NSCLC 患者 。结果显示，LUAD 患者术前血浆样本中 ctDNA 的检出率为 81%，非 LUAD 的 NSCLC 患者中 ctDNA 的检出率为 100% 。在 pTNM 分期为 I 期的 LUAD 患者中，ctDNA 检出率达到 57%，显著高于以往研究。此外，ctDNA 的释放与患者吸烟状况（包年史）以及 LUAD 的高级别主要亚型（如实体型和筛状型）相关，而与致癌事件（如 EGFR 突变和 MET 外显子 14 跳跃）无显著关联。

基线 ctDNA 水平对 OS 的预后意义

研究进一步评估了 ctDNA 水平与患者临床结局的关系。结果表明，术前 ctDNA 状态可显著预测 LUAD 患者的整体生存率（OS）和无复发生存率（RFS） 。术前 ctDNA 阴性的患者，其 5 年 OS 可达 100%，而 ctDNA 低水平和高水平的患者，5 年 OS 分别为 61.4% 和 48.8% 。当分析仅限于那些使用以往方法难以可靠检测出 ctDNA 的患者时，发现 ctDNA 水平低于 80 ppm 仍与不良 OS 和 RFS 相关 。这表明，超灵敏检测方法能够识别出一组低风险的 LUAD 患者。在非 LUAD 患者中，ctDNA 水平与临床结局的关联较弱，ctDNA 水平高于中位数与 RFS 降低无显著关联，这凸显了 LUAD 和非 LUAD 患者中 ctDNA 与疾病生物学关系的差异。

多变量分析确认术前 ctDNA 的独立预后价值

研究人员进行多变量 Cox 回归分析，纳入组织学、辅助治疗状态、吸烟状态、病理分期和年龄等因素。结果显示，在 LUAD 和非 LUAD 患者的合并队列中，ctDNA 的存在（无论是作为连续指标还是分类指标）均与 OS 和 RFS 降低独立相关 。不过，在非 LUAD 组中，ctDNA 水平作为 RFS 的独立预后因素并不显著 。此外，当调整组织学亚型（鳞状与非鳞状）和其他临床病理因素后，ctDNA 作为连续变量对 RFS 和 OS 的预后影响也不显著 。

综合上述研究结果，研究人员利用 NeXT Personal 平台实现了对早期肺癌患者术前 ctDNA 的超灵敏检测。该平台能够在更多早期肺腺癌患者中检测到 ctDNA，且 ctDNA 状态与患者的临床结局密切相关，可用于术前疾病分层，有助于识别出不同风险的患者群体，为制定个性化治疗方案提供重要依据。虽然该研究存在一定局限性，如数据为回顾性分析，且检测方法存在复杂性高、成本高和周转时间长等问题，但这一研究成果依然为早期肺腺癌的临床管理带来了新的曙光。未来，随着前瞻性研究的开展和检测技术的不断优化，超灵敏 ctDNA 检测有望在早期肺癌的精准治疗中发挥更大的作用，进一步改善患者的预后。