低剂量淋巴清除预处理下肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）疗法在高风险转移性黑色素瘤患者中的安全性和有效性

减量预处理化疗联合TIL疗法在高危黑色素瘤患者中的安全性和疗效评估显示，使用30mg/kg环磷酰胺和25mg/m²氟达拉滨方案可降低毒性而不影响抗肿瘤效果，ORR达44%，中位PFS为5.1个月，证实减量方案在高风险人群中的可行性。

Lilit Karapetyan|Joel Kuriakose|Elizabeth DiMaggio|Kimberly Ward|Jamie Chau|Christopher Otteni|Denise Kalos|Johannes Ali|MacLean S. Hall|Matthew Beatty|Olga V. Klinkova|Mohammed E. Alomar|Eric E. Gaskill|Rebecca M. Gonzalez|Hanna Bailey|Michael Yu|Nam Tran|Lianicet Rodriguez-Alfonso|Ella Vieira|Karla Adams|Shari Pilon-Thomas

美国佛罗里达州坦帕市H. Lee Moffitt癌症中心与研究所皮肤肿瘤科

摘要

背景

非清髓性淋巴细胞减少化疗（LDC）是TIL疗法的关键组成部分，可确保T细胞的植入并维持持久的抗肿瘤活性。通常采用高剂量预处理方案：环磷酰胺（Cy，每日60 mg/kg，持续2天）和氟达拉滨（Flu，每日25 mg/m²，持续5天）。鉴于LDC的毒性，我们研究了一组黑色素瘤患者接受减量LDC后，再联合标准护理的利菲卢塞尔（lifileucel）和高剂量白细胞介素-2（IL-2）的安全性和有效性。

方法

符合以下至少一项纳入标准的患者接受了减量LDC：年龄≥70岁、近期有脑转移（BM）、肠道转移、出血情况，或需要持续使用抗血小板药物或抗凝剂。LDC方案为环磷酰胺每日30 mg/kg，持续2天；氟达拉滨每日25 mg/m²，持续5天；随后在第0天进行利菲卢塞尔输注，并给予高剂量IL-2（最多6次）。安全性评估采用CTCAE v5标准，有效性评估采用RECIST v1.1标准。

结果

共治疗17名患者，其中9名（53%）为男性，8名（47%）为女性，中位年龄66岁（范围36-78岁）。5名患者曾接受过脑转移治疗，59%的患者乳酸脱氢酶（LDH）水平超过正常上限（ULN），35%的患者携带BRAFv600突变。平均IL-2使用次数为5次（范围1-6次）。因低血压需使用升压药（n=1例）、4级低钠血症（n=1例）、感染（n=1例）、心房颤动（n=1例）、心动过速（n=1例）、3级转氨酶升高（n=2例）、心动过速伴体重增加或缺氧（n=3例）以及患者拒绝治疗（n=1例）而中断IL-2使用。所有患者均出现4级淋巴细胞减少，绝对淋巴细胞计数中位最低值为0.005 k/µL。最常见的3级治疗相关不良事件包括贫血（n=12例，71%）、血小板减少（n=8例，47%）和发热性中性粒细胞减少（n=10例，59%），中性粒细胞计数中位恢复时间为7天。TIL输注后30天内无患者死亡。长期不良事件包括3级葡萄膜炎（n=1例）和3级听力损失（n=1例），均发生在利菲卢塞尔输注后30天以上。在16名可评估患者中，7名（44%）获得部分缓解，3名（18%）病情稳定，6名（38%）病情进展。中位随访时间为10个月（95%置信区间：8.7个月-未达到[NR]），中位缓解时间为未达到[NR]，中位无进展生存时间为5.1个月（95%置信区间：4.3个月-未达到[NR]，中位总生存时间也为未达到[NR]。

结论

减量使用环磷酰胺能够使高风险转移性黑色素瘤患者顺利完成TIL疗法，且对疗效无明显负面影响。这是首次报告在高风险患者中应用实际风险分层策略，通过减量淋巴细胞减少处理后再进行利菲卢塞尔输注的安全性和可行性。这些发现值得在进一步的前瞻性研究中进行验证。

引言

肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）的过继细胞疗法是针对对免疫检查点阻断（ICB）治疗耐药的黑色素瘤（MEL）患者的有前景的二线治疗方法。1, 2, 3 该疗法包括三个部分：淋巴细胞减少预处理、过继细胞输注以及根据耐受情况给予高剂量白细胞介素-2（IL-2）。4, 5, 6 非清髓性淋巴细胞减少化疗（LDC）是TIL疗法的关键，可确保T细胞的植入和持久性，从而产生持久的抗肿瘤效果。TIL输注前的预处理为自体T细胞扩增创造了空间，促进肿瘤细胞死亡，增加抗原呈递，并通过TLR-4信号通路增强先天免疫反应。8 LDC还能减少髓系来源的抑制细胞和调节性T细胞，同时增加IL-7和IL-15等稳态细胞因子，从而影响T细胞扩增。8, 9, 10, 11

在TIL疗法中，通常使用高剂量预处理方案：环磷酰胺（Cy，每日60 mg/kg，持续2天）和氟达拉滨（Flu，每日25 mg/m²，持续5天）。然而，这种剂量方案使用的环磷酰胺/氟达拉滨剂量远高于嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）疗法，且通常需要住院治疗以预防和处理毒性。在经过大量预处理的转移性黑色素瘤患者中，这种方案显示出31.3%的客观缓解率（ORR），中位总生存期（OS）为13.9个月，5年OS为19.7%。1, 2, 3 尽管有研究致力于通过PD-1基因敲除或生成表达膜结合IL-15的TIL来进一步提高体外扩增TIL的质量，但关于最佳淋巴细胞减少策略的研究仍较少。12 实际上，TIL疗法具有独特的毒性特征，许多不良事件与LDC相关，如发热性中性粒细胞减少、贫血、血小板减少等。1, 13, 13 因此，改进LDC方案以提高其安全性，从而扩大其在更多患者中的适用范围和临床效益至关重要。

本研究评估了在高风险转移性黑色素瘤患者中采用减量LDC（环磷酰胺每日30 mg/kg，持续2天；氟达拉滨每日25 mg/m²，持续5天），随后联合标准护理的利菲卢塞尔和高剂量IL-2（600,000 IU/kg）的安全性、可行性和初步临床效果。该减量方案参考了Nissani等人的研究，他们采用累积环磷酰胺剂量60 mg/kg（每日30 mg/kg，持续2天）和累积氟达拉滨剂量125 mg/m²（每日25 mg/m²）进行TIL输注前的预处理。14 我们还评估了减量LDC对骨髓抑制和恢复的影响，以及毒性指标（如C反应蛋白（CRP）和铁蛋白）与TIL治疗相关不良事件之间的关联，考虑到这些指标在细胞治疗相关毒性中的预测作用。15, 16

方法部分

这是一项单中心回顾性观察性研究，研究对象为2024年9月至2025年5月期间在Moffitt癌症中心接受标准护理利菲卢塞尔治疗的转移性黑色素瘤患者，这些患者之前已对免疫检查点阻断疗法±靶向疗法无效。2024年9月修订了机构临床标准，以确定适合接受标准护理TIL疗法的高风险转移性黑色素瘤患者群体。

患者和疾病特征

研究共纳入17名患者。其人口统计学特征和基线疾病情况见表1。

患者之前接受过的系统治疗中位数为3种（范围1-7种）。13名（76%）患者同时接受了抗程序性死亡-1（anti-PD-1）和细胞毒性T淋巴细胞抗原-4（CTLA-4）联合治疗，7名（41%）患者同时接受了抗PD-1和抗淋巴细胞激活基因-3（anti-LAG-3）联合治疗。所有携带BRAFv600突变的患者均曾接受过相应治疗。

讨论

TIL疗法显著改善了晚期黑色素瘤患者的生存预后，但其应用主要限于功能状态良好、并发症较少的患者。因此，疾病负担较重、年龄≥70岁或存在心肺问题的患者常被排除在TIL相关临床试验之外，或在以往研究中占比较低。此外，LDC治疗可能伴随显著的毒性反应。

作者信息

LK、ED、JK、MJ、FLL、JJM、AAS和SPT设计了本研究。LK、JC、KW、DK和SPT制定了研究方法。EV、KA、LR、MA、OK、NT、MY、MJ、FLL、ZE、NIK、ASB、JM、AAT和LK负责患者治疗。CDO进行了正式的放射学疗效评估。ED、EG、RG和HB负责药物剂量调整。研究工作由LK、SPT、JC、KW、JRA、MH、MCP、JEM、MSB、JSZ、RG、JB、VKS和AAS共同完成，包括组织采集和纵向数据收集。

利益冲突声明

LK从Iovance Biotherapeutics, Inc.、Valar Labs, Inc.获得研究支持，并从Immatics, Inc.获得差旅支持。JC从Iovance Biotherapeutics, Inc.和Valar Labs, Inc.获得研究支持。CO从Iovance Biotherapeutics, Inc.获得研究支持。MCP从Replimune和Guidepoint获得咨询费用。AAS从Iovance Biotherapeutics, Inc.、Turnstone Biologics, Inc.和Provectus Biopharmaceuticals获得研究支持。

致谢

我们感谢Pilon-Thomas实验室成员、免疫细胞治疗项目团队和皮肤治疗项目团队，以及所有患者及其家属的支持。