在神奇的生命科学领域,辅助生殖技术是许多家庭迎来新生命的希望之光。随着全球不孕夫妇数量的增加,越来越多的人将目光投向体外受精(IVF)等辅助生殖手段。在 IVF 过程中,常常会有多余的胚胎需要冷冻保存,以备后续使用。而冷冻保存的关键就在于冷冻保护剂的选择,它如同胚胎在 “冷冻世界” 里的 “保护神”,直接影响着胚胎的质量和后续的临床结局。
目前,蔗糖和海藻糖作为常用的非渗透性冷冻保护剂,在人类卵母细胞和精子冷冻保存方面的研究较多,但它们对人类胚胎玻璃化冷冻的影响却知之甚少。而且不同研究结果存在差异,比如在猪的研究中,海藻糖和蔗糖在卵母细胞成熟、受精等方面未见差异;在人类卵巢组织冷冻中,虽海藻糖有优势趋势但不显著 。这使得冷冻保护剂的选择成为一个亟待解决的谜题,为了揭开这个谜题,来自韩国昌原韩美医院(Hanyang University Changwon Hanmaeum Hospital)和庆尚国立大学(Gyeongsang National University)的研究人员开展了一项意义重大的研究。
研究人员进行了一项回顾性队列研究,对 2021 年 1 月至 2023 年 12 月期间在单一生殖中心接受冷冻胚胎移植(FET)的 616 名患者的数据进行分析。他们将患者分为两组,分别使用基于蔗糖(实验室自制)和海藻糖(商业化产品)的玻璃化溶液对囊胚进行冷冻保存。
研究用到的主要关键技术方法如下:首先是控制卵巢刺激(COH)技术,使用 GnRH 拮抗剂方案刺激卵巢;接着是体外受精(IVF)和胚胎培养技术,在特定的温度和气体环境下培养胚胎;然后是胚胎评估技术,依据特定标准对胚胎形态进行评估;最后是囊胚玻璃化冷冻及复苏技术,采用改良的冷冻和复苏方法。
研究结果如下:
- 患者基本特征:两组患者在年龄、BMI 方面无显著差异,但在不孕持续时间、不孕原因、孕次、产次和子宫内膜准备类型上差异显著。
- 胚胎及临床结局:共解冻蔗糖组 305 个、海藻糖组 418 个囊胚,两组囊胚存活率相近(97.38% vs. 98.09%,p>0.05)。海藻糖组优质囊胚比例更高(63.66% vs. 55.56%),劣质囊胚比例更低(2.20% vs. 8.08%,p<0.001) 。海藻糖组植入率(52.84% vs. 43.94%)和妊娠囊(G-sac)率(47.56% vs. 39.39%)显著更高(p<0.05),虽然海藻糖组 β-hCG 阳性率更高,但差异无统计学意义(63.92% vs. 56.44%,p>0.05)。
- 多因素分析:多变量逻辑回归分析显示,女性年龄对植入有负面影响(OR=0.910,95%CI=0.861−0.961,p<0.001),孕次有正面影响(OR=1.340,95%CI=1.054−1.703,p=0.017)。优质囊胚显著增加植入可能性(OR=2.846,95%CI=1.34−6.011,p=0.006) ,海藻糖玻璃化溶液相比蔗糖溶液,植入可能性显著更高(OR=1.439,95%CI=1.021−2.029,p=0.038)。
研究结论和讨论部分指出,与基于蔗糖的玻璃化溶液相比,基于海藻糖的玻璃化溶液可提高植入率,改善解冻后囊胚质量。然而,由于本研究中两种溶液制备方式不同(蔗糖为实验室自制,海藻糖为商业化产品),无法确定结果差异仅由糖的类型导致,也可能受商业培养基其他成分影响。此外,本研究存在一定局限性,如胚胎质量评估依赖形态学分析,具有主观性且无法检测细胞微观结构损伤;研究为回顾性设计,可能存在选择偏倚和回忆偏倚 。未来研究应采用前瞻性设计,在相同类型玻璃化溶液中对比海藻糖和蔗糖的作用,并结合更先进的胚胎评估方法,如时间推移成像或分子分析,以更准确地评估玻璃化溶液对胚胎学和临床结局的影响。
总的来说,这项研究为辅助生殖技术中冷冻保护剂的选择提供了重要参考,虽然目前还不能完全确定海藻糖的独立作用,但它展现出的优势为后续研究指明了方向,有望推动辅助生殖技术的进一步发展,帮助更多家庭实现生育梦想。该研究成果发表在《Middle East Fertility Society Journal》上,为该领域的研究贡献了宝贵的资料。