研究人员采用内侧半月板失稳(Destabilization of the medial meniscus, DMM)小鼠模型模拟人类OA进展过程。该模型在术后4-8周出现轻度退行性变化,10周时发展为严重软骨退化,疾病进程与人类OA相似。研究团队通过双重离心技术从C57BL/6小鼠血液中制备出白细胞富集型PRP(Leukocyte-rich PRP, LR-PRP)和白细胞贫乏型PRP(Leukocyte-poor PRP, LP-PRP),并在术后第2、4、6周进行关节腔注射。通过组织学分析、免疫组化检测和三维微计算机断层扫描(three-dimensional micro-computed tomography, 3DμCT)等多维度评估手段,系统比较了不同PRP的治疗效果。
主要技术方法
研究采用10周龄雌性C57BL/6小鼠(n=36)建立DMM模型,通过心脏穿刺获取全血样本,使用双重离心技术制备LR-PRP和LP-PRP。通过全自动血液分析仪进行血细胞计数验证,LR-PRP白细胞浓度为(64.7±16.5)×102/μL,LP-PRP为(13.0±6.9)×102/μL。在术后第2、4、6周进行关节腔注射(6μL),12周后处死动物进行组织学评估。采用OARSI评分系统分析软骨退化,免疫组化检测CD68+巨噬细胞浸润,3DμCT评估骨密度(bone mineral density, BMD)变化。