急性胰腺炎是一种起病急骤、可危及生命的炎症性疾病，全球发病率在过去60年间持续攀升，重症患者死亡率高达30%-50%。目前临床治疗以液体复苏、镇痛营养支持为主，而蛋白酶抑制剂等靶向药物因特异性不足疗效有限。近年来研究发现，线粒体功能障碍是腺泡细胞损伤的核心环节，但线粒体在AP发病中的具体调控机制尚未明确。
在这项发表于《Journal of Integrative Medicine》的研究中，成都中医药大学附属医院急诊医学科团队聚焦于天然双酚类化合物和厚朴酚（Honokiol）。该成分提取自厚朴药材，既往研究显示其可通过抑制促炎信号通路、调节代谢谱等多途径发挥保护作用，但其作用机制是否与线粒体功能调控相关仍待揭示。值得注意的是，和厚朴酚在心血管疾病中被证实可激活线粒体去乙酰化酶SIRT3，而SIRT3作为主要线粒体去乙酰化酶，能否通过调节氧化磷酸化（OXPHOS）通路影响AP进程成为本研究的关键科学问题。
研究人员通过雨蛙素（caerulein）诱导的小鼠AP模型发现，SIRT3表达随疾病进展显著下调，其抑制剂3-TYP可加剧胰腺损伤和蛋白质超乙酰化。蛋白质组学分析显示，AP中线粒体OXPHOS通路受损最显著，其中复合体Ⅲ亚基细胞色素c1（CYC1）的表达异常尤为突出。分子对接模拟提示SIRT3与CYC1存在高亲和力结合（-28.8 kcal/mol），而免疫共沉淀实验首次证实AP中CYC1乙酰化水平升高，和厚朴酚干预可通过SIRT3依赖的方式逆转这一现象。
关键技术方法包括：1）雨蛙素诱导的小鼠AP模型与胆汁酸（NaT/TLCS）刺激的266-6细胞系/原代胰腺腺泡细胞模型；2）蛋白质组学与生物信息学分析（MitoCarta3.0注释、GSEA富集分析）；3）分子对接与免疫共沉淀验证蛋白互作；4）透射电镜观察线粒体超微结构；5）ATP检测与活性氧（ROS）荧光成像。
3.1. AP严重程度与胰腺SIRT3表达降低相关且受SIRT3抑制加剧
通过时间序列分析发现，SIRT3在AP发生12小时后表达最低，且其抑制会加重组织损伤和蛋白质乙酰化，证实SIRT3在AP中具有保护作用。
3.2. 和厚朴酚通过SIRT3相关机制减轻AP胰腺损伤和超乙酰化
分子对接显示和厚朴酚与SIRT3结合能为-6.6 kcal/mol。体内实验表明5 mg/kg和厚朴酚可恢复SIRT3表达，降低p65磷酸化水平和炎症因子mRNA表达。
3.3. SIRT3抑制逆转和厚朴酚在AP中的保护作用
联合使用SIRT3抑制剂3-TYP后，和厚朴酚对血清淀粉酶、脂肪酶的改善作用被部分抵消，说明其功效依赖SIRT3活性。同时发现AP中NAD+ 含量显著降低，提示能量代谢紊乱可能影响SIRT3功能。
3.4. 蛋白质组学揭示AP中线粒体OXPHOS受损
从6582个定量蛋白中筛选出1070个差异表达蛋白，其中79个线粒体相关蛋白主要分布在线粒体基质（41.77%）和内膜（29.11%）。OXPHOS为最显著富集通路，复合体Ⅰ/Ⅲ/Ⅳ/Ⅴ多个亚基表达下调。
3.5. 和厚朴酚恢复AP中线粒体结构和OXPHOS蛋白表达
透射电镜显示和厚朴酚能缓解线粒体肿胀和嵴断裂。Western blotting证实其可逆转ATP5F1A（复合体Ⅴ）、UQCRC2（复合体Ⅲ）和MT-CO1（复合体Ⅳ）的表达下降。
3.6-3.7. 和厚朴酚减轻细胞模型中的氧化应激和炎症
在266-6细胞和原代腺泡细胞中，和厚朴酚预处理可降低胆汁酸诱导的ROS生成、细胞坏死和TNF-α、IL-1β、IL-6等炎性因子释放。
3.8. 和厚朴酚促进SIRT3介导的CYC1去乙酰化
蛋白质组学筛选出ATP5MK、CYC1、UQCRH三个OXPHOS亚基作为关键靶点。免疫共沉淀直接证实和厚朴酚可通过SIRT3降低CYC1乙酰化水平。
本研究首次揭示和厚朴酚通过SIRT3-CYC1轴调控线粒体OXPHOS的新机制。SIRT3表达下降导致CYC1等关键蛋白乙酰化水平升高，破坏电子传递链功能，而和厚朴酚可激活SIRT3并促进其与CYC1结合，恢复线粒体能量代谢。该发现不仅阐明了天然药物多靶点作用的特点，也为开发以线粒体乙酰化调控为核心的AP治疗策略提供了理论依据。值得注意的是，虽然研究通过抑制剂实验证实了SIRT3的功能必要性，但未来仍需基因敲除模型进一步验证，且CYC1具体乙酰化位点及其功能影响也有待深入探索。
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