Calonectria属(子囊菌门,壳孢菌纲,假壳孢目,拟盘多毛孢科)包括历史上在采用“一种真菌 = 一个名称”规则之前被归类为Cylindrocladium无性形态属的物种,是一类多产的植物病原真菌,影响全球335多种宿主,包括观赏植物、水果作物、林业物种和农产品[1],[2],[3]。随着其宿主范围的扩大[3],这些真菌以引起叶枯病、茎基部和根部腐烂、枝条枯萎、猝倒病和插条腐烂而闻名,尤其是在高价值的观赏园艺生产系统中,常常导致巨大的经济损失[4]。在林业宿主中,Eucalyptus物种尤其容易受到感染,Calonectria叶枯病(CLB)被认为是主要Eucalyptus种植国家中最严重的疾病之一,包括印度[5]。
在印度北部,CLB迅速成为一种主要威胁,特别是在高密度的Eucalyptus苗圃和幼林中,温暖的温度、高湿度、遮荫和长时间的叶片湿润为病原体的繁殖和疾病传播创造了非常有利的环境。受感染的叶片最初会出现小而圆形或不规则的浸水状病变,这些病变迅速扩大并融合成广泛的坏死区域,导致逐渐发展的叶枯病(图1A–1C)、过早落叶、茎部坏死(图1D),在严重情况下还会导致植株大量死亡[3],[5],[6],[7],[8]。高发病率和严重程度显著降低了苗圃的生产力,并影响了野外种植的成功,最终导致生长和生物量积累减少。此外,CLB造成的生理压力增加了宿主对次级病原体和非生物胁迫因子的敏感性,从而加剧了其整体影响。因此,CLB对印度的Eucalyptus栽培构成了严重限制,带来了重大的经济挑战,并威胁到人工林系统的长期可持续性。最近,来自比哈尔邦和北阿坎德邦的农民联系了作者,报告了Eucalyptus苗圃和种植园中的大规模死亡情况,并寻求疾病诊断和管理的科学指导。此外,这些真菌最近也被报道影响印度北部的其他重要经济作物[9],[10],[11]。在这种情况下,准确的分类鉴定对于可靠地区分具有重叠形态特征但致病性、宿主特异性和流行病学行为不同的密切相关的物种至关重要,从而能够进行精确诊断、采取有效的检疫措施并制定有针对性的管理策略。
近年来,将经典形态学与多基因位点系统发育分析相结合的研究不断揭示了Calonectria内部更大的多样性,目前已确认141个物种[2],[3],[12],[13]。根据Calonectria鉴定的推荐指南[12],印度记录了几种新的分类单元和新物种[3],[5],[7],[8],[9],[10],[11],这突显了尤其是在Eucalyptus种植广泛的北部亚热带地区丰富的但研究不足的多样性。同时,其他影响Eucalyptus的叶部病原体的反复出现以及它们表现出的重叠症状[14],[15],[16]进一步复杂化了田间诊断工作。这种复杂性的增加强调了定期、严格的监测以及详细形态学检查和基于序列的鉴定在准确界定病原体多样性和有效管理疾病爆发方面的必要性。
在我们对Eucalyptus CLB的持续研究中,从严重受害的叶片中分离出了许多类似Calonectria的真菌菌株;然而,大多数菌株在标准和严格的孢子形成条件下都无法产生孢子[17],[18]。在健康的Eucalyptus叶片上进行的致病性测试一致再现了典型的CLB症状,所有诊断性的无性形态特征都在叶片病变处出现,包括形成类似鱼尾鳍的独特 vesicles。因此,本研究旨在根据目前接受的Calonectria物种鉴定指南[12]对这些独特的菌株进行描述。