摘要A015：胸导管插管作为细胞疗法中CD3+ T细胞及其他表型的新来源 免费

直接从胸导管采集淋巴用于CAR-T细胞治疗，相比传统外周血采集中CD3+ T细胞比例提升6.5倍（75% vs 10%），每微升样本含356,250个细胞（外周血87,000），且富含4倍于外周血的未成熟B细胞。该方法降低成本30%，采集时间缩短至15分钟，支持细胞治疗产品开发与术后监测。

摘要

引言：

使用嵌合抗原受体（CAR）T细胞的过继细胞疗法是淋巴瘤和白血病传统治疗方法的一种有力替代方案。目前，针对实体瘤的CAR T细胞治疗新方法也在研发中。所有这些方法都有一个共同点，即需要从患者体内获取幼稚T细胞来制备CAR T细胞。目前获取T细胞的方法是白细胞分离术，这种方法成本高昂且耗时较长，并且由于免疫抑制作用存在细胞扩增失败的风险。本研究的目的是评估直接通过胸导管获取T细胞用于CAR T细胞制备的可行性，并比较胸导管淋巴液与外周血中的细胞分布情况。

方法：

使用一种新型的经血管通路/抽吸装置，通过中心静脉途径从胸导管中抽取了大约10毫升的淋巴液。同时从患者体内采集了外周血样本。根据制造商的说明，将样本置于Stable-Lyse Stable-Store缓冲液（SmartTube，加利福尼亚州帕洛阿尔托）中培养。对每个样本进行了基于CyTOF技术的磷酸化流式细胞术分析，未进行任何修改。每个样本分析了250,000个细胞事件。数据分析和细胞分选在FlowJo软件（FlowJo LLC，俄勒冈州阿什兰）中完成。

结果：

观察到以下细胞/表型分布：CD3+（淋巴细胞）在总细胞事件中的比例分别为：血液中10%，淋巴液中75%；每100微升样本中的CD3+（淋巴细胞）数量分别为：血液中87,000个，淋巴液中356,250个。树突状细胞（定义为CD4+ HLA-DR+ CD38+）在血液中为401个，在淋巴液中为5,700个。在浆细胞样细胞和髓系细胞类型中，淋巴液中的浆细胞样细胞比例显著较高。最后发现幼稚B细胞在胸导管淋巴液中的浓度是外周血的4倍。

结论：

直接通过胸导管抽吸淋巴液相比传统的白细胞分离术具有多项优势：采集时间和成本更低、可扩展性更强（荧光镜检查在所有医院均可进行，而白细胞分离术则不然）、细胞存活率更高，且能够采集到更多稀有细胞类型。来自循环淋巴液的幼稚T细胞和中央记忆T细胞表现出较低的抑制因子表达、更快的扩增能力、更强的细胞毒性，并且在CAR-T产品形式下可能需要较低的剂量。幼稚B细胞对于新兴的B细胞工程（如ePCs、eB、eBregs）至关重要。由于直接抽吸技术具有可重复性，因此可以用于治疗后的定期监测、重复采集或再输注。