积雪草（Centella asiatica，ECa 233）对RAW 264.7巨噬细胞的免疫刺激活性

该研究通过FT-IR和NMR光谱分析确认了Centella asiatica标准提取物ECa 233的化学结构，并以RAW 264.7巨噬细胞为模型，发现其能显著提升NO、H2O2和ROS水平，同时增强巨噬细胞活性与功能，并激活TNF-α、IL-1β、IL-6等促炎因子及TGF-β、IL-10等调节性因子的表达，提示ECa 233具有免疫激活作用，需进一步体内研究验证。

摘要

背景

先天免疫系统是身体的第一道防线，巨噬细胞在病原体识别和清除过程中起着核心作用。尽管积雪草（Centella asiatica）长期以来被用于传统医学，但其免疫刺激作用尚未得到充分阐明。本研究探讨了标准化积雪草提取物（ECa 233）对RAW 264.7巨噬细胞的免疫刺激活性。

方法

首先使用傅里叶变换红外光谱（FT-IR）和核磁共振（NMR）对ECa 233进行了表征。FT-IR确定了关键的功能基团，而NMR则提供了关于分子结构的详细信息，共同确保了后续药理学评估所需的精确提取物特性。RAW 264.7细胞以1.5625–200 μg/mL的浓度接受ECa 233处理。研究了一氧化氮（NO）、过氧化氢（H₂O₂）和活性氧（ROS）的生成情况，并通过zymosan-NBT还原试验和中性红摄取试验评估了巨噬细胞的功能活性。炎症基因表达通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）进行分析。

结果

ECa 233显著增加了NO、H₂O₂和ROS的生成，同时不损害细胞活力，并增强了巨噬细胞的功能活性。RT-PCR结果显示，促炎细胞因子（TNF-α、IL-1β、IL-6）、调节性细胞因子（TGF-β、IL-10、IL-12）、表面标记物（CXCR-1、CXCR-2）以及炎症介质（iNOS、COX-2）的表达上调。

结论

这些发现表明ECa 233能够激活巨噬细胞并促进免疫反应，支持其作为免疫刺激剂的潜力。需要进一步的体内研究来确认其疗效和治疗相关性。