加布里埃拉·维吉尼亚·桑多瓦尔(Gabriela Virginia Sandoval)| 奥古斯丁·阿韦亚内达-卡塞雷斯(Agustín Avellaneda-Cáceres)| 瓦莱里娅·萨拉萨尔(Valeria Salazar)| 劳拉·萨布丽娜·阿吉雷(Laura Sabrina Aguirre)| 迭戈·马丁·梅迪纳(Diego Martin Medina)| 卡洛斯·哈维尔·加罗(Carlos Javier Garro)| 罗西奥·马里尼(Rocío Marini)| 克劳迪娅·莫尔塞拉(Claudia Morsella)| 劳拉·门德斯(Laura Mendez)| 胡安·弗朗西斯科·米切洛德(Juan Francisco Micheloud)| 费尔南多·帕奥利基(Fernando Paolicchi)
动物健康领域:“贝尔纳多·豪尔赫·卡里略博士”(Dr. Bernardo Jorge Carrillo),半干旱查科地区动物研究所(IIACS),农业与畜牧业研究中心(CIAP),阿根廷国家农业技术研究所(INTA)
摘要 副结核病(Paratuberculosis, PTBC)是一种由Mycobacterium avium 亚种. paratuberculosis (简称Map)引起的反刍动物慢性肉芽肿性肠炎。尽管在牛、羊和鹿中已描述了PTBC的子宫内传播现象,但关于奶山羊的相关数据较为有限。本研究调查了来自阿根廷胡胡伊省(Jujuy)一个PTBC高发地区的32只怀孕萨能奶山羊(Saanen goats)的子宫内Map感染情况。研究人员使用了多种方法分析母体和胎儿组织,包括细菌培养、IS900 PCR检测、组织病理学和血清学检测。所有山羊的皮内试验结果均为阳性,其中75%的胎儿表现出与PTBC一致的病理学病变。在45只胎儿中,有10只检测出了Map菌。在两个病例中观察到了肉芽肿性病变,但未检测到抗酸杆菌。此外,来自细菌培养阳性的母羊的胎儿感染率是阴性母羊的7.8倍。这表明母体的细菌载量是胎儿感染的关键预测因素。这些发现首次证明了萨能奶山羊存在子宫内Map传播现象,即使是在亚临床病例中也是如此,表明该物种的垂直传播可能比之前认为的更为普遍。这对小型反刍动物的PTBC控制计划具有重要意义。
引言 副结核病(PTBC),又称约翰氏病(Johne's disease),是一种由Mycobacterium avium 亚种. paratuberculosis (简称Map)引起的反刍动物慢性疾病,主要影响牛、羊和鹿(Paolicchi等,2003年;Fiorentino等,2012年)。一些研究人员认为这是一种人畜共患病,另有研究则认为Map是人类克罗恩病(Crohn's disease)的致病因子(Cirone等,2007年;Balseiro等,2019年)。PTBC对小型反刍动物的经济影响尤为严重。该疾病在全球范围内均有分布(Smith和Sherman,2011年),其主要传播方式为出生后的粪-口途径(Collins,2003年)。传统上认为,随着年龄增长,动物对Map感染的抵抗力增强,因此年轻动物更容易感染(Whittington和Windsor,2009年)。然而,一些研究表明,所有年龄段的山羊和鹿都可能感染Map(Collins,2003年)。实验表明,山羊比牛或羊更容易感染PTBC(Stewart等,2007年)。
PTBC的传播途径包括通过环境污染的水平传播以及垂直传播,这在牛、羊和鹿中均有报道(Lambeth等,2004年;van Kooten等,2006年;Thompson等,2007年)。Map菌已在胎儿(如胎盘绒毛膜和淋巴结)和母体(如子宫黏膜)组织中被分离出来(Tejedor,2002年;Sevilla等,2007年;Vasini Rosell等,2020年),并且既在临床病例(如消瘦伴或不伴腹泻)也在亚临床病例(Lambeth等,2004年)中发现。
在受感染的牛群中,子宫内传播仅占2%的病例。但如果仅考虑血清阳性或疑似Map感染的母羊,传播率会上升至4.3%(Adaska和Whitlock,2012年)。据一些作者报道,来自亚临床感染母羊的胎儿中有9%,来自临床PTBC感染母羊的胎儿中有39%出生时已感染Map(Whittington和Windsor,2009年)。在山羊中,仅有一只侏儒山羊(Alinovi等,2009年)和两只韩国黑山羊(Lee等,2025年)的病例报告了子宫内传播。在这两项研究中,这些山羊的病情已处于非常晚期。因此,有人认为子宫内传播主要发生在疾病晚期,即怀孕母羊被感染时。然而,由于Map菌可以在早期阶段扩散到包括子宫在内的多个器官(Stehman,1996年;Sweeney等,1992年),这种传播也可能发生在亚临床阶段。如前所述,大多数关于Map子宫内传播的研究集中在牛、羊和鹿身上,而对亚临床状态的奶山羊知之甚少。因此,本研究旨在通过细菌培养和PCR技术确定PTBC阳性母羊胎儿的子宫内感染情况,并描述Map在母体和胎儿组织中引起的病理学病变。
研究人群 本研究在阿根廷胡胡伊省的一个萨能奶山羊群中进行。该农场约有1500只泌乳山羊。该地区PTBC呈地方性流行,估计既往感染率为23%。疾病的诊断依据是阿根廷食品安全与质量局(SENASA)的规定(第30条,决议第128/2012号)所推荐的禽类纯化蛋白衍生物(PPDa)皮内试验,结合间接ELISA检测方法。
生前检查 所有接受评估的山羊体重正常(体况评分>3),没有体重下降和/或腹泻的症状。对32只山羊的器官进行肉眼检查后发现,24只山羊存在典型的PTBC病变,表现为肠系膜淋巴结肿大和水肿。这些淋巴结的切片显示有钙化区域以及回肠内的增生性肠炎。所有参与研究的母羊的PPDa皮内试验结果均为阳性,证实其曾暴露于Map菌。
讨论 本研究证实了怀孕山羊存在子宫内PTBC传播现象,32只山羊中有10只的胎儿被感染。所有分析的山羊均暴露于Map菌,并通过多种技术确诊(肉眼病理学、组织病理学、血清学和细菌培养)。
尽管先前的多项研究报道了多种反刍动物中的子宫内Map传播现象,但尚未在萨能奶山羊中观察到(Whittington和Windsor,2009年;Alinovi等,2009年)。
结论 本研究提供了直接证据,证明亚临床感染Map的怀孕山羊存在子宫内的Map感染,并证实子宫内传播在疾病流行病学中起着重要作用,可能导致幼年山羊发病。了解这种传播的风险有助于制定减少感染动物数量或减轻病情严重程度的管理策略。目前,阿根廷尚无针对小型反刍动物的PTBC疫苗。
作者贡献声明 奥古斯丁·阿韦亚内达-卡塞雷斯(Agustín Avellaneda-Cáceres): 撰写、审稿与编辑,方法学部分。瓦莱里娅·萨拉萨尔(Valeria Salazar): 撰写、审稿与编辑,资源提供。劳拉·萨布丽娜·阿吉雷(Laura Sabrina Aguirre): 撰写、审稿与编辑,方法学部分。迭戈·马丁·梅迪纳(Diego Martin Medina): 撰写、审稿与编辑,方法学部分。卡洛斯·哈维尔·加罗(Carlos Javier Garro): 撰写、审稿与编辑,数据分析。罗西奥·马里尼(Rocío Marini): 撰写、审稿与编辑,资源提供。克劳迪娅·莫尔塞拉(Claudia Morsella): 资源提供。劳拉·门德斯(Laura Mendez): 资源提供。胡安·弗朗西斯科·米切洛德(Juan Francisco Micheloud): 撰写、审稿与编辑,监督工作。
资金支持 本研究得到了阿根廷国家农业技术研究所(INTA)的支持(项目编号2023-PE-L01-I057和PD-114)。
利益冲突声明 作者声明没有已知的财务利益冲突或可能影响本文研究的个人关系。
致谢 本研究是加布里埃拉·维吉尼亚·桑多瓦尔(Gabriela Virginia Sandoval)博士论文的一部分,旨在完成她的农业科学博士学位(阿根廷布宜诺斯艾利斯国立马德普拉塔大学)。作者感谢奶山羊养殖者和屠宰场工作人员提供的协助和技术支持。
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