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来自国际团队的研究人员开发了条件稳定性MS2和PP7衣壳蛋白变体(dMCP/dPCP),通过结合环化置换与降解决定子掩蔽技术,显著降低活细胞RNA成像中未结合探针的背景信号,实现了单分子水平mRNA动态调控的可视化及双色同步成像,为RNA研究提供了高灵敏度工具。
通过蛋白质工程策略将环化置换(circular permutation)与降解决定子(degron)掩蔽技术相结合,研究者开发出条件稳定性MS2和PP7衣壳蛋白变体(命名为dMCP与dPCP)。这些变体在未结合RNA配体时快速降解,从而显著降低荧光蛋白融合探针的背景信号。该技术实现了活细胞不同亚区室内单信使RNA(mRNA)分子差异化调控过程的高灵敏度可视化,并利用正交MS2与PP7模组完成双色成像,同步解析同一细胞中不同RNA物种的动态行为。此项工作为含MS2/PP7序列的RNA研究提供了低背景、多功能的成像工具,在生物技术应用领域具有广泛潜力。
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