引言部分阐述了多发性骨髓瘤（MM）作为不可治愈血液恶性肿瘤的临床挑战，重点强调达雷妥尤单抗（DARA）治疗后耐药性进展及微小残留病（MRD）监测的临床需求。研究指出传统骨髓（BM）穿刺存在空间异质性导致的假阴性风险，而外周血（PB）来源的细胞外囊泡（EVs）可作为动态监测疾病活动的理想生物标志物。
研究方法层面，团队对57例DARA治疗方案MM患者及12例健康对照的PB/BM样本进行密度梯度超速离心分离EVs，通过透射电镜（TEM）、Western blot（TSG101/CD63标志物）及质谱分析验证EVs纯度。流式细胞术检测16种膜蛋白（CD8/CD29/CD31/CD36/CD38/CD44/CD55/CD59/CD61/CD63/CD81/CD147/CD321/LAT1/PDL1）表达水平，采用蒙特卡洛交叉验证（MCCV）结合支持向量机（SVM）算法进行多变量ROC曲线分析。
结果揭示三大核心发现：首先，MM患者PB-EVs中CD31、CD36、CD44显著升高（p<0.05），而CD8和LAT1显著降低，其中CD44在BM-EVs中表达水平较匹配PB-EVs进一步提升（p=0.03），提示其可能源于骨髓瘤细胞特异性分泌。其次，通过2年随访数据首次发现CD38、LAT1和PDL1在DARA长期应答组表达显著高于短期应答组及无应答组（p=0.024-0.003），其中PDL1的预测效能最为突出（AUC=0.859）。最后，通过主成分分析（PCA）和热图聚类构建的MM诊断组合（CD8/CD44/CD147/PDL1）与疗效预测组合（CD55/LAT1/PDL1）分别实现87.5%和88.6%的整体准确率，显著优于单一标志物检测。
讨论部分深入解析了EVs蛋白表达模式的生物学意义：CD44与CD59/CD147类似在BM-EVs中富集的现象，支持肿瘤源性EVs在骨髓微环境中的特异性释放假说；而CD8与LAT1的逆向表达模式可能反映T细胞免疫应答与肿瘤代谢的重编程关联。研究同时指出当前超速离心技术的临床转化瓶颈，建议未来开发EVs磁珠捕获或纳米流式检测等高通量方法。
结论确认PB-EVs蛋白标志物组合可有效区分MM患者与健康人群，并能预测DARA治疗持久性，为实现无创性MRD监测提供新型分子工具。后续需通过扩大样本量和纵向采样验证标志物动态变化与临床结局的关联强度。
