PMEPA1 与 NEDD4L 携手抑制多发性骨髓瘤进展，开辟治疗新方向

时间：2025年3月6日

来源：Cell Biochemistry and Biophysics

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为探究前列腺跨膜雄激素诱导蛋白 1（PMEPA1）在多发性骨髓瘤（MM）中的作用机制，研究发现 PMEPA1 结合 NEDD4L 抑制 Wnt/β-catenin 信号通路，或为 MM 治疗提供新靶点。

多发性骨髓瘤（Multiple Myeloma，MM）是一种令人棘手的血液系统恶性肿瘤，如同隐藏在血液中的 “杀手”。它由浆细胞的克隆性增殖和恶性扩张引发，在骨髓中不断 “作恶”，致使骨质遭到破坏、肾脏功能衰竭以及贫血等一系列严重问题。在美国，每年新增 MM 病例超 35000 例，因癌症相关死亡人数约 13000 人，患者的中位生存期不足五年。随着全球人口老龄化加剧，MM 的发病率和死亡率也在持续攀升。尽管目前 MM 的治疗取得了一些进展，但仍缺乏有效的根治策略。因此，深入揭示 MM 的潜在分子机制，寻找新的治疗靶点迫在眉睫。

金华市人民医院血液科的研究人员开展了一项关于 PMEPA1 在 MM 中作用机制的研究，相关成果发表在《Cell Biochemistry and Biophysics》杂志上。该研究旨在明确 PMEPA1 在 MM 中的具体生物学功能及作用机制，为 MM 的治疗提供新的思路和潜在靶点。

研究人员在此次研究中主要运用了细胞转染技术，将含有 PMEPA1 的质粒（Ov-PMEPA1）、空载体（Ov-NC）、靶向 NEDD4L 的小干扰 RNA（si-NEDD4L）等转染至 RPMI-8226 细胞中；通过免疫印迹（Immunoblotting）检测相关蛋白的表达水平；利用共免疫沉淀（Co-immunoprecipitation，Co-IP）验证蛋白之间的结合情况；采用实时定量 PCR（Real Time-quantitative PCR，RT-qPCR）分析基因表达量；借助 CCK-8、EDU 染色、流式细胞术等方法评估细胞的增殖、周期分布和凋亡情况。

研究结果如下：

PMEPA1 在 MM 细胞中低表达：通过 RT-qPCR 和免疫印迹实验发现，与 HS-5 细胞相比，PMEPA1 在 U266、OPM-2 和 RPMI-8226 等 MM 细胞系中表达显著降低，其中 RPMI-8226 细胞中 PMEPA1 水平最低，因此后续研究选择该细胞系。
PMEPA1 上调抑制 MM 细胞增殖并促进凋亡：将含有 PMEPA1 的质粒转染至 RPMI-8226 细胞后，细胞中 PMEPA1 表达明显升高。与空载体组相比，过表达 PMEPA1 显著抑制了细胞增殖，使细胞周期阻滞在 G₀/G₁期，促进细胞凋亡。同时，细胞中增殖相关蛋白 Ki67 和 PCNA 表达下调，凋亡相关蛋白 Bcl-2 水平降低，Bax 和 cleaved caspase3 水平升高。
PMEPA1 通过与 NEDD4L 结合上调其表达：BioGrid 网站和 HDOCK SERVER 预测 PMEPA1 与 NEDD4L 存在相互作用，且在 MM 细胞系中 NEDD4L 表达低于 HS-5 细胞。过表达 PMEPA1 可增加 RPMI-8226 细胞中 NEDD4L 的 mRNA 和蛋白水平，Co-IP 实验进一步证实了两者在细胞内的结合。
PMEPA1 通过结合 NEDD4L 抑制 MM 的恶性生物学行为：在 RPMI-8226 细胞中敲低 NEDD4L 后，细胞增殖能力增强，细胞周期中 S 期细胞比例增加，Ki67 和 PCNA 表达上调，细胞凋亡受到抑制，Bcl-2 水平升高，Bax 和 cleaved caspase3 水平降低。这表明 NEDD4L 沉默阻断了 PMEPA1 过表达对 MM 细胞恶性表型的抑制作用。
PMEPA1 通过结合 NEDD4L 使 Wnt/β-catenin 通路失活：免疫印迹实验显示，PMEPA1 过表达可下调 RPMI-8226 细胞中 β-catenin、c-Myc 和 cyclin D1 的表达，而敲低 NEDD4L 则会逆转这种下调作用，说明 PMEPA1 通过与 NEDD4L 结合使 Wnt/β-catenin 通路失活。
PMEPA1 通过结合 NEDD4L 使 Wnt/β-catenin 信号失活来抑制 MM 的恶性生物学行为：使用 Wnt/β-catenin 通路激活剂 LiCl 处理 RPMI-8226 细胞后，细胞中 β-catenin、c-Myc 和 cyclin D1 水平升高，细胞增殖能力增强，凋亡受到抑制，这进一步证实了 PMEPA1 通过结合 NEDD4L 使 Wnt/β-catenin 信号失活，从而抑制 MM 的恶性进展。

研究结论和讨论部分指出，该研究证实了 PMEPA1 在 MM 细胞增殖和凋亡中的重要作用，揭示其抑癌机制与结合 NEDD4L 并使 Wnt/β-catenin 信号通路失活相关。PMEPA1 和 NEDD4L 在 MM 细胞中均呈低表达，过表达 PMEPA1 可发挥显著的抗 MM 效应。NEDD4L 作为与 PMEPA1 相互作用的蛋白，在两者对 MM 细胞的调控中起到关键作用。Wnt/β-catenin 信号通路在 MM 的发生发展中至关重要，靶向该通路是治疗 MM 的有效策略，而 PMEPA1/NEDD4L 轴恰好通过调节该通路影响 MM 细胞的生物学行为。这一研究成果为 MM 的治疗提供了新的潜在靶点和理论依据，有望推动 MM 治疗领域的进一步发展，为众多 MM 患者带来新的希望。