子宫内膜癌，作为女性生殖道最常见的恶性肿瘤之一，近年来在全球范围内的发病率和死亡率呈上升趋势，且发病年龄逐渐年轻化。当前，子宫内膜癌的早期诊断主要依赖症状表现，缺乏特异性的筛查手段，而对于疾病预后的判断也不够精准，这导致患者的治疗效果和生存质量受到严重影响。寻找新的分子生物标志物，成为攻克子宫内膜癌难题的关键所在。
吉林大学护理学院和第二医院等研究机构的研究人员，聚焦于羧肽酶 A4（CPA4）展开了深入研究。他们的研究成果发表在《European Journal of Medical Research》上，为子宫内膜癌的诊疗带来了新的曙光。
研究人员采用了多种关键技术方法。首先，从癌症基因组图谱（TCGA）和基因表达综合数据库（GEO）获取数据，进行生物信息学分析，研究 CPA4 的表达情况。同时，收集 116 例子宫内膜癌患者的石蜡包埋标本及 15 例正常对照样本，通过免疫组化实验验证 CPA4 的表达。此外，构建蛋白 - 蛋白相互作用（PPI）网络、进行基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析、基因集富集分析（GSEA）等，探究 CPA4 在子宫内膜癌中的作用机制。还利用细胞实验，包括细胞增殖、侵袭、迁移等实验，进一步验证 CPA4 的功能。
研究结果如下：
- CPA4 在子宫内膜癌中差异表达：通过对 TCGA 和 GEO 数据库的 RNA 测序数据进行分析，发现 CPA4 在子宫内膜癌组织中显著高表达。无论是在非配对样本还是配对样本中，与正常组织相比，CPA4 在子宫内膜癌中的表达均明显升高。此外，利用 GSE17025 数据集进行验证，构建的受试者工作特征（ROC）模型曲线下面积（AUC）为 0.836，表明 CPA4 在子宫内膜癌诊断方面具有较高的准确性。
- CPA4 表达与临床相关性：免疫组化分析显示，CPA4 蛋白在正常组织中表达较低，在肿瘤组织中显著升高，且其表达与组织学分级、淋巴转移以及核增殖抗原 Ki67 的表达相关。ROC 曲线分析表明，CPA4 蛋白表达数据的 AUC 为 0.895，提示 CPA4 表达与肿瘤的发生、发展密切相关。
- CPA4 表达与生存预后：对 TCGA 数据库中子宫内膜癌患者的数据进行分析，结果显示 CPA4 表达与患者的组织学分级、淋巴浸润程度相关。生存分析表明，高表达 CPA4 的患者预后较差，其总体生存（OS）、疾病特异性生存（DSS）和无进展生存期（PFI）均受到影响。此外，构建的基于 CPA4 的 nomogram 模型，经校准曲线验证，具有良好的预测准确性，一致性指数（C-index）为 0.823，进一步证实了 CPA4 在子宫内膜癌预后评估中的重要价值。
- 单基因差异表达及相关性分析：单基因差异分析筛选出 730 个差异基因，构建 PPI 网络并确定了 16 个核心（HUB）基因。对 CPA4 进行单基因相关性分析，选取了 41 个相关性最强的基因。这些基因在子宫内膜癌组织和正常组织中的表达存在显著差异，部分基因的表达水平与临床结局相关，提示它们可能在子宫内膜癌的发生、发展过程中发挥重要作用。
- CPA4 的功能富集分析：GO 分析发现，CPA4 及其差异表达基因在角化、角质形成细胞分化、中间丝组织等生物学过程，以及 G 蛋白偶联受体结合、丝氨酸型内肽酶抑制剂活性等分子功能方面显著富集。KEGG 分析显示，这些基因在金黄色葡萄球菌感染、嗅觉转导、雌激素信号通路等多个信号通路中富集。GSEA 分析表明，CPA4 与同种异体排斥、氧化磷酸化、Kras 信号通路等过程相关，揭示了 CPA4 在子宫内膜癌发生、发展中的潜在作用机制。
- CPA4 下调对子宫内膜癌细胞的影响：通过细胞实验，利用 shRNA 下调 CPA4 表达，发现子宫内膜癌细胞系 HEC-1-A 和 Ishikawa 的增殖、侵袭和迁移能力均显著下降，细胞凋亡增加，细胞周期阻滞在 G2M 期。这表明 CPA4 在子宫内膜癌细胞的增殖、侵袭和转移过程中起着关键作用。
研究结论和讨论部分指出，CPA4 作为一种潜在的生物标志物，在子宫内膜癌的诊断、预后评估和治疗方面具有重要意义。它不仅与肿瘤的发生、发展密切相关，还参与了多个关键信号通路的调控，如雌激素信号通路、KRAS 信号通路等。虽然目前对 CPA4 的分子机制了解还不够深入，且研究主要基于数据库分析和细胞实验，缺乏体内实验的验证，但 CPA4 仍为子宫内膜癌的研究和临床应用开辟了新的方向。未来需要进一步开展大规模的临床研究和体内实验，深入探究 CPA4 的具体生物学功能和作用机制，开发针对 CPA4 的特异性抑制剂，为子宫内膜癌患者提供更加精准、有效的治疗方案。
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