在植物的奇妙世界里,菟丝子是一种特殊的存在。它是专性寄生植物,无法离开宿主独自生存,还会严重破坏农作物的产量,让农民们头疼不已。一直以来,人们对菟丝子寄生后的生长过程了解较多,比如它那能穿透宿主组织、吸取水分和养分的吸器(haustorium),在蓝光、远红光等因素影响下的寄生机制逐渐被揭示。然而,菟丝子寄生前的生长阶段却像是一个神秘的 “黑匣子”。它的种子如何在各种环境中萌发?幼苗又怎样在短暂的独立生活期内寻找宿主?这些问题就像一团迷雾,笼罩在科研人员心头。为了揭开这些谜团,更好地防治菟丝子对农作物的侵害,来自日本冈山大学(Graduate School of Environmental, Life, Natural Science and Technology, Okayama University)和东北大学(Graduate School of Life Sciences, Tohoku University)的研究人员展开了一项重要研究。他们的研究成果发表在《Plant Growth Regulation》杂志上,为我们理解菟丝子的生存策略提供了关键线索。
研究人员主要运用了以下几种关键技术方法:一是种子处理与培养,从寄生在拟南芥(Arabidopsis thaliana)上的菟丝子植株获取种子,经过硫酸浸泡、消毒等处理后,在不同条件的培养基上培养;二是显微镜观察,利用立体显微镜(SMZ1500)和光学显微镜(ECLIPS 80i)对幼苗形态和组织切片进行观察分析;三是实时逆转录 PCR(RT-PCR)技术,提取幼苗 RNA 并反转录为 cDNA,以此为模板进行实时 PCR,检测相关基因的表达情况。
研究结果如下:
- 远红光促进种子萌发:研究发现,在多种光处理中,远红光能显著增强种子萌发,而红光则抑制萌发。交替使用红光和远红光处理时,后施加的光对萌发影响更大,这表明存在可逆的光敏色素调节机制。而且,远红光虽然会使幼苗茎伸长缩短,但能诱导吸器形成。
- 碱性 pH 抑制种子萌发:当培养基 pH 高于 8.0 时,种子萌发和幼苗茎伸长都受到显著抑制,而酸性 pH 为 5.0 时对幼苗生长无明显影响。在温度方面,高达 30°C 的高温促进萌发,低于 20°C 的低温则起到抑制作用,幼苗茎伸长对温度的响应趋势与之相似。此外,高浓度的 NaCl、KCl 和甘露醇会抑制种子萌发,完全淹没在水中也会使种子无法萌发。
- 激素对萌发和生长的影响:在众多激素实验中,1μM 的赤霉素(GA3)和 1μM 的茉莉酸甲酯(MeJA)能促进种子萌发,5μM 的脱落酸(ABA)和 100μM 的乙烯前体 1 - 氨基环丙烷 - 1 - 羧酸(ACC)则抑制萌发。MeJA 还能显著促进幼苗茎伸长,而吲哚 - 3 - 乙酸(IAA)、ABA、ACC 和水杨酸(SA)则抑制伸长。另外,5μM 的人工合成生长素 2,4 - 二氯苯氧乙酸(2,4-D)能延长根尖毛状体的存活时间,1μM 的激动素(kinetin)可诱导幼苗形成鳞片叶和侧枝,处理 20 天后还会在茎基部和根尖形成愈伤组织样细胞簇。
- 氨基酸和多胺的作用:在 20 种氨基酸测试中,丙氨酸和天冬氨酸能轻微但显著提高种子萌发率,组氨酸则降低萌发率,不过所有测试氨基酸对幼苗茎伸长均无显著影响。多胺处理对种子萌发无明显作用,但热精胺(thermospermine)会抑制幼苗茎伸长,还会严重抑制茎基部维管束细胞分化,使根细胞形状扭曲,加速根组织退化。
- 基因表达的环境响应:通过 RT-PCR 实验发现,叶绿体中核酮糖 - 1,5 - 二磷酸羧化酶 / 加氧酶(Rubisco)小亚基编码基因 RbcS 的同源基因,在从黑暗转移到白光下时表达未上调;光敏色素 A(Phytochrome A,PhyA)的同源基因在黑暗处理 24 小时后表达增加。同时,ABA 响应的 SPMS、SA 响应的 VSP2、MeJA 响应的 WRKY18 以及热休克蛋白基因 HSP90,在相应处理后表达均增加。
研究结论和讨论部分指出,菟丝子种子和幼苗对环境条件有着独特的响应。例如,其对红光和远红光的响应与许多植物相反,可能存在独特的光敏色素信号传导机制,这一机制在一些寄生植物中可能是独立进化的。茉莉酸甲酯促进种子萌发和幼苗生长的机制还需进一步研究,它可能与光敏色素信号通路存在关联。此外,细胞分裂素处理下菟丝子能形成鳞片叶,这与寄生植物的叶片退化现象有关,可能与宿主依赖性或光合作用缺陷程度相关。而氨基酸和多胺对种子萌发和幼苗生长的影响,也为理解菟丝子的生理过程提供了新视角。这项研究揭示的这些独特响应和机制,为进一步探索菟丝子的生存策略和开发针对性的防治方法奠定了重要基础,对农业生产中菟丝子的防治具有重要的理论指导意义 。