抗CD20长期治疗中高表达白细胞介素-1β的单核细胞亚群表型变化及其在多发性硬化症中的免疫调控意义

（编辑推荐）本研究通过单细胞多组学技术揭示抗CD20治疗（anti-CD20 therapy）显著改变多发性硬化症（MS）患者外周血中高表达IL-1β（IL1Bhigh）的单核细胞亚群比例及功能，其独特的促炎（CXCL8/CCL3/CCL4/TNFα）特征和中枢浸润（CXCR4/LEF1调控）能力为理解B细胞耗竭疗法的非B细胞效应提供了新视角。

Abstract

研究团队采用靶向单细胞转录组和表位测序（CITE-seq）技术，对64例多发性硬化症（MS）患者抗CD20治疗前后及健康对照（HC）的外周血单个核细胞（PBMC）进行分析，发现一类独特的经典单核细胞亚群——IL1B^high单核细胞，其表达谱和丰度变化揭示了疾病与治疗的关键关联。

Objective

旨在解析MS患者与HC间PBMC的疾病相关及治疗相关变化，聚焦抗CD20疗法对非B细胞免疫群体的影响。

Methods

纳入19例初治MS患者和11例HC，采集基线、急性B细胞耗竭期、免疫恢复期和完全耗竭期样本。通过BD Rhapsody平台进行靶向单细胞测序（399个免疫基因+30种表面蛋白），结合光谱流式细胞术验证。采用WNN聚类、SCANet基因共表达网络（GCN）和DiNiro基因调控网络（GRN）分析。

Results

1. 1.

   细胞亚群特征：IL1B^high单核细胞（CD14⁺⁺CD16⁻）在HC中占比8.1%，而未经治疗MS患者仅0.8%。抗CD20治疗后其比例增加6倍，且呈现促炎因子（CXCL8/CCL3/CCL4/TNFα）高表达特征。

2. 2.

   迁移能力：MS患者该群体高表达CXCR4，GRN分析提示LEF1/RUNX3调控其CNS浸润能力，治疗后CXCR4表达下降。

3. 3.

   基因网络：MYC调控的GRN模块在HC和治疗后样本中激活，涉及白细胞趋化（GO:0002690）和细胞因子信号通路（GO:0071345）；而基线样本中EGR3主导的GRN与血管迁移相关。

4. 4.

   细胞互作：IL1B^high单核细胞是PBMC中主要信号传递者，通过分泌IL1B/CCL3/CXCL8等与髓系细胞和B细胞广泛互作。

Interpretation

抗CD20治疗可能通过减少IL1B^high单核细胞的中枢浸润，将其滞留于外周并重塑其MYC相关炎症网络，这为解释该疗法的非B细胞机制提供了新靶点。

Graphical Abstract

图文摘要呈现实验设计、单细胞分析流程及核心发现：治疗前后IL1B^high单核细胞的动态变化与功能重编程。

Patients and Methods

样本来自DanNORMS临床试验（NCT04688788），采用Ocrelizumab（OCR）或Rituximab（RTX）治疗。通过SepMate分离PBMC，靶向测序数据经Seurat和Milo分析，流式验证CD14⁺IL1B⁺细胞比例。

Discussion

1. 1.

   临床关联：IL1B^high单核细胞的外周滞留可能减少CNS炎症灶形成，与抗CD20疗效相关。

2. 2.

   生物学意义：该群体是TNFα的主要来源，其MYC调控网络在健康状态下维持免疫监视，而MS中失调可能导致异常迁移。

3. 3.

   局限性：未评估CNS内该群体变化，靶向测序覆盖基因有限，需未来全转录组验证。

Author Contributions

M.W.和Z.I.主导研究设计；M.L.E.和K.D.参与数据分析；团队获丹麦基金会及诺和诺德支持。

（注：全文严格依据原文数据，未添加非文献结论，专业术语如WNN、CITE-seq等均保留原文格式。）