新型p53再激活剂HO-3867与奥拉帕尼协同治疗p53突变妇科癌症的机制与临床潜力

本研究针对p53突变型妇科癌症治疗难题，通过筛选HO-3867和APR-246两种p53再激活剂，发现HO-3867能显著抑制细胞增殖（IC50低至1.5-3.3 μM），并与PARP抑制剂奥拉帕尼产生协同效应。RNA测序揭示其通过p53依赖/非依赖双重通路抑制DNA修复（如HRR）并激活凋亡，为克服PARPi耐药提供新策略。

研究背景与意义

妇科癌症中，p53蛋白的突变堪称"分子暴君"——超过90%的卵巢癌和最恶性子宫内膜癌都存在TP53基因突变，导致这个原本的"基因组守护者"丧失抑癌功能，甚至获得促癌特性。更棘手的是，这类肿瘤常对标准化疗和PARP抑制剂（PARPi）产生耐药，尤其是当BRCA基因同时突变时，患者生存率急剧下降。尽管APR-246作为首个进入临床的p53再激活剂在血液肿瘤中展现潜力，但其在实体瘤中的效果有限，且作用机制尚未完全阐明。这促使科学家们寻找更有效的靶向策略，而来自The University of New Mexico的Kimberly K. Leslie团队的最新研究，为这一困境带来了突破性解决方案。

关键技术方法

研究采用6种妇科癌细胞模型（包括HRR缺陷型PEO1/HRR修复型PEO4配对株），通过CyQUANT法测定药物IC₅₀，荧光淬灭和等温滴定量热法（ITC）验证HO-3867与p53结合。体内实验使用OVCAR3异种移植模型，通过生物发光成像评估疗效。RNA测序分析转录组变化，Western blot检测关键蛋白表达。

研究结果

1. 细胞模型特征

研究团队构建了涵盖不同p53突变类型（Y220C、R248Q等）和HRR状态的细胞库，包括p53部分功能保留的Ishikawa（M246V）和完全缺失的Hec50co。Western blot证实突变型p53的过表达特征，为后续药物筛选奠定基础。

2. HO-3867展现卓越抗肿瘤活性

相比于APR-246（IC₅₀ 5.9-48 μM），HO-3867显示出10倍更强的增殖抑制能力（IC₅₀ 1.5-3.3 μM）。ITC实验揭示其以1:2化学计量比结合p53二聚体，解离常数K_d=2.48 μM，证实其直接靶向作用。值得注意的是，HO-3867在p53 null的Hec50co细胞中仍有效，提示STAT3等多靶点机制。

3. 协同作用的发现

当HO-3867与奥拉帕尼联用时，5/6细胞系显示协同效应（组合指数CI<0.8）。在OVCAR3小鼠模型中，联合组肿瘤生长抑制显著优于单药（p<0.01）。而APR-246仅对HRR缺陷细胞（如PEO1）有协同作用，在HRR正常细胞中甚至出现拮抗。

4. 分子机制解析

RNA测序发现HO-3867独特的三重作用：

• •

  p53功能重建：下调突变型TP53 mRNA，上调p21和Gadd45，恢复细胞周期调控

• •

  DNA修复抑制：显著下调RAD51、POLD1等HRR基因，伴随53BP1蛋白积聚

• •

  免疫激活：诱导MHC I类和免疫蛋白酶体基因，增强肿瘤免疫原性

5. 非经典凋亡通路激活

在p53 null细胞中，HO-3867通过上调TP63/PUMA激活ER应激凋亡通路，而STAT3下游生存基因（BCL2、Survivin）被抑制。HSP70家族基因（如HSPA6）的剧烈上调（log₂FC达12.1）提示蛋白稳态应激反应。

结论与展望

这项发表于《Translational Oncology》的研究首次系统比较了两种p53再激活剂的疗效差异，揭示HO-3867通过"三重打击"机制——恢复p53功能、阻断DNA修复、解除STAT3介导的免疫抑制，成为克服PARPi耐药的有力武器。其独特之处在于：

1. 1.

   对HRR状态无严格依赖，适用人群更广

2. 2.

   在p53 null模型中仍有效，拓展了传统p53靶向治疗范畴

3. 3.

   转录组特征提示与免疫治疗的潜在联合价值

尽管APR-246已进入临床，但HO-3867在实体瘤中展现的优越药效和明确机制，使其成为下一代p53靶向药物的强候选。未来研究可探索其与免疫检查点抑制剂的联用，或针对不同p53突变构象的精准用药策略，为妇科癌症治疗开辟新纪元。