编辑推荐：
麻省总医院布莱根分校（Mass General Brigham）和麻省理工学院-哈佛大学布罗德研究所（Broad Institute）的研究人员发现了可以提高嵌合抗原受体（CAR）-T细胞疗法疗效的基因修饰。CAR-T细胞疗法是一种利用经过修饰的患者T细胞靶向癌症的免疫疗法。该研究利用CRISPR筛选技术，精确定位了在体外培养和多发性骨髓瘤临床前模型中影响T细胞功能和存活的基因。他们的研究成果和技术发表在《自然》杂志上，有望开发基于T细胞的癌症免疫疗法。
CAR-T 细胞疗法是一种利用经过修饰的患者 T 细胞靶向癌症的免疫疗法。最新研究利用 CRISPR 筛选技术，精确定位了在培养物和多发性骨髓瘤临床前模型中影响 T 细胞功能和存活的基因。他们的研究成果和技术发表在《自然》杂志上，有望开发基于 T 细胞的癌症免疫疗法。
“我们对T细胞的整个生命周期进行了筛选，将它们与癌细胞共培养，然后进一步将细胞转移到动物模型中，”“我们在体内发现了一些重要的调控因子，而这些因子是我们无法从体外结果中预测到的。”麻省总医院克兰兹家族癌症研究中心研究员、麻省总医院布莱根医疗系统创始成员、布罗德研究所肿瘤免疫疗法发现引擎主任Robert Manguso博士说。
“测试单个基因修饰以找到能够增强 CAR-T 功能的修饰将耗费大量的时间和金钱。我们的方法可以让我们一次测试数百种修饰，”共同资深作者、麻省总医院布莱根分校细胞免疫治疗项目主任、布罗德癌症项目准成员 Marcela Maus 医学博士补充道。
CAR-T细胞疗法彻底改变了血液癌症的治疗，但迄今为止，其对实体瘤或复发性或难治性多发性骨髓瘤患者的疗效尚不显著。此外，循环中的CAR-T细胞数量会随着时间的推移而减少，从而限制了它们的长期活性。
在这项麻省理工的研究中，研究团队开发了一种 CRISPR 筛选技术，靶向人类供体来源的 CAR-T 细胞中的 135 个基因，以识别可能改善细胞持久性和功能的基因。研究人员在体外培养了这些 CRISPR 编辑的细胞，并将其移植到多发性骨髓瘤小鼠模型中，并追踪了它们在体内长达 21 天的存活情况。
对改造后的CAR-T细胞的分析表明，删除细胞周期调控基因CDKN1B可增强CAR-T细胞的增殖、长期持久性和抗肿瘤活性。研究人员还观察到，一些基因在体外影响功能，但在体内不影响；而另一些基因则促进了肿瘤微环境中的早期增殖，但并未带来长期益处。
作者提出，针对CAR-T 细胞中的CDKN1B可以增强多发性骨髓瘤患者的治疗效果，并建议利用其筛选方法的未来研究可以改进其他癌症的治疗方法。
另外一项研究介绍了CELLFIE，这是一个CAR T细胞工程和高内涵CRISPR筛选平台，能够系统地改造CAR T细胞并评估其治疗潜力。
“我们的 CELLFIE 平台并行测试了所有人类基因的敲除，并评估哪些基因能够使 CAR-T 细胞更健康、更持久或更不易衰竭，”该研究的第一作者兼联合导师、现任美国加州 Arc 研究所组长 Paul Datlinger 解释说。
这导致了一个令人惊讶的遗传靶点的发现：敲除 RHOG 基因可使 CAR-T 细胞在临床前模型中对抗白血病的效力显著增强。
与历经数百万年进化的天然T细胞不同，CAR-T细胞在基因上被赋予了新的功能，但其进化过程并未对其进行优化。因此，在天然免疫中发挥重要作用的基因反而会削弱CAR-T细胞的功能。
研究人员利用 CELLFIE 技术，设计并测试了数千个 CAR-T 细胞基因敲除方案。为了优先筛选出最有希望的筛选目标基因，他们在临床前小鼠模型中开发了一种新颖的体内 CRISPR 筛选方法，并验证了多个基因敲除方案对 CAR-T 细胞有益。最值得注意的是，与标准 CAR-T 细胞相比，RHOG 敲除的 CAR-T 细胞扩增更佳，更能抵抗衰竭，并更有效地控制白血病。更多细节见：
生物通微信公众号
生物通 版权所有
