靶向β-连环蛋白共享突变的TCR-T细胞疗法：实体瘤治疗新突破

（编辑推荐）本研究首次证实靶向CTNNB1S37F驱动突变的TCR-T细胞能有效清除表达HLA-A02:01/HLA-A24:02的实体瘤。通过质谱鉴定新抗原肽并筛选高亲和力TCR，在黑色素瘤和子宫内膜癌PDX模型中实现肿瘤完全消退，为靶向Wnt/β-catenin通路的免疫治疗提供新策略。

摘要

HLA结合的复发驱动突变肽段是T细胞免疫治疗的潜在靶点。研究发现CTNNB1^S37F突变产生的两种新抗原肽可被HLA-A02:01和HLA-A24:02递呈，该突变导致β-catenin功能增强，美国每年新增病例超7,000例。从健康供体幼稚T细胞中分离出特异性TCR，转导的T细胞在体外能有效杀伤CTNNB1^S37F+细胞系和患者来源类器官，并在黑色素瘤细胞系和小鼠子宫内膜腺癌PDX模型中清除已形成的肿瘤。

主要发现

突变癌症的流行率和发病率

分析MSK-MET研究25,775例样本显示，子宫内膜癌（3.35%）、宫颈癌（2.91%）和小肠癌（1.06%）中CTNNB1^S37F突变频率最高，美国年新增病例7,155例。结合HLA-A02:01（人群频率35.48%）和HLA-A24:02（18.82%），理论可覆盖3,885例患者。

新抗原肽的鉴定与定量

通过免疫肽组学在单等位基因B721.221细胞中鉴定出HLA-A02:01结合的10肽（YLDSGIHFGA）和HLA-A24:02结合的9肽（SYLDSGIHF）。靶向质谱显示Mel888和Hutu80细胞表面分别呈现101和16个（HLA-A02:01）以及17和20个（HLA-A24:02）新抗原肽复合物，野生型肽几乎未检测到。新抗原肽-MHC复合物半衰期显著长于野生型（HLA-A*02:01：7.3小时 vs 4.1小时）。

TCR筛选与功能验证

从16名健康供体筛选获得4个TCR（3个HLA-A02:01限制性，1个HLA-A24:02限制性）。TCR^A2-2对肽的敏感性达499 pM，优于临床级TCR^1G4（24.6 nM）。在重复杀伤实验中，TCR^A2-2能持续清除Hutu80^A2细胞，而TCR^A24对Mel888^A24的EC₅₀为227 pM。

体内治疗效果

NXG小鼠模型中，TCR^A2-2治疗组8天内全部清除Mel888^A24+A2黑色素瘤（n=7），随访115天仅1例复发；子宫内膜癌PDX模型（n=7）中6例达到完全缓解。值得注意的是，复发肿瘤出现HLA-A02:01丢失但保留HLA-A24:02表达，提示免疫编辑机制差异。

临床转化潜力

与靶向KRAS^G12V（年适用16,593例）和TP53^R175H（11,638例）相比，CTNNB1^S37F适用人群规模较小，但针对目前缺乏有效靶向治疗的Wnt/β-catenin通路。通过DRUP类试验和HLA分型技术，可筛选适合接受该疗法的患者。

讨论

该研究突破性地解决了β-catenin靶向治疗的两大难题：通过MS直接证实突变肽的递呈，并利用健康供体TCR库克服肿瘤诱导的免疫耐受。虽然突变/HLA组合频率较低，但针对驱动突变的特点（如肿瘤早期出现、转移灶保守表达）使其成为联合治疗的理想靶点。研究为开发靶向其他"不可成药"癌基因的免疫疗法提供了范式。