肝细胞非凋亡性Caspase-8-Meteorin通路促进MASH纤维化的机制与治疗意义

本研究揭示了肝细胞caspase-8通过非凋亡机制驱动代谢功能障碍相关脂肪性肝炎（MASH）纤维化的新通路。研究人员发现caspase-8-YY1轴诱导meteorin分泌，经c-Kit-STAT3途径激活肝星状细胞（HSC），促进胶原沉积。该研究为MASH纤维化提供了新的治疗靶点，解释了靶向凋亡功能 caspase抑制剂临床试验失败的原因，为GalNAc-siRNA等肝靶向治疗策略提供了理论依据。

代谢功能障碍相关脂肪性肝炎（MASH）已成为慢性肝病的主要病因，但其纤维化机制尚未完全阐明，限制了治疗策略的发展。传统观点认为肝细胞凋亡是MASH进展的核心环节，然而针对凋亡相关caspase的抑制剂在临床试验中未能改善纤维化，提示存在非凋亡机制。值得注意的是，全基因组关联研究曾发现CASP8基因变异与肝损伤标志物ALT升高显著相关，但机制不明。这一矛盾现象激发了研究人员对caspase-8非凋亡功能的探索。

本研究采用多组学方法结合临床样本分析，关键技术包括：①人类MASH肝组织与小鼠模型的免疫组化/免疫印迹验证；②肝细胞特异性Casp8基因敲除小鼠（AAV8-TBG-Cre注射）的体内功能研究；③条件培养基转移实验与蛋白质组学筛选（LC-MS/MS和RNA-seq）；④染色质免疫沉淀（ChIP）验证转录调控机制；⑤原代肝星状细胞激活实验（人源与鼠源）；⑥肝细胞球体培养模型验证人源细胞表型。

肝细胞caspase-8缺失抑制MASH纤维化但不影响凋亡

研究人员发现人类MASH肝组织中CASP8 mRNA和全长caspase-8蛋白表达显著升高，且主要定位于肝细胞。通过FPC饮食（果糖-棕榈酸盐-胆固醇）和HF-CDAA（高脂肪胆碱缺乏L-氨基酸定义饮食）两种MASH小鼠模型证实，肝细胞特异性敲除caspase-8可显著减轻肝脏纤维化（天狼星红染色减少）、HSC激活标志物（α-SMA、COL1A1）下降和炎症细胞浸润减少，但不影响肝细胞凋亡水平（cleaved caspase-3和TUNEL染色无变化）。

Meteorin连接caspase-8与HSC激活

通过分泌蛋白组学筛选发现meteorin（Metrn）是caspase-8调控的关键分泌因子。在Casp8敲除的肝细胞条件培养基中，meteorin水平显著降低，且该培养基失去激活HSC的能力。重要的是，回补重组meteorin蛋白可恢复HSC的激活状态，表现为Timp1、Spp1等纤维化基因上调。机制上，meteorin通过激活c-Kit受体和STAT3磷酸化（Y705位点）驱动HSC促纤维化表型。

caspase-8通过YY1诱导meteorin转录

研究发现caspase-8通过其死亡效应结构域（DED domain）而非蛋白酶活性域促进YY1核转位。ChIP实验证实YY1直接结合Metrn启动子区域，而Casp8沉默会降低YY1的核定位及其与Metrn启动子的结合能力。单细胞RNA-seq数据显示Casp8和Yy1在MASH相关肝细胞亚群（mNASH-Hep1/2）中显著富集。

Meteorin在MASH纤维化中的致病作用

临床样本分析显示MASH患者肝组织和原代肝细胞中METRN/meteorin表达显著升高，且与纤维化程度正相关。在肝细胞特异性Casp8敲除小鼠中回补AAV8-TBG-Metrn可完全逆转纤维化改善表型，而使用AAV8-H1-shMetrn沉默肝细胞meteorin表达则能有效阻止纤维化进展。

结论与意义

本研究揭示了肝细胞中非凋亡性caspase-8通过YY1-Metrn-c-Kit-STAT3轴促进HSC激活和MASH纤维化的全新机制。该发现解释了靶向caspase蛋白酶活性抑制剂（如emricasan）临床试验失败的原因，强调了靶向非凋亡功能的重要性。从转化医学角度，研究为肝靶向siRNA治疗（如GalNAc-siCASP8或siMETRN）提供了理论依据，为逆转MASH纤维化提供了新的治疗策略。