CALR依赖的内质网N-糖蛋白成熟有助于日本脑炎病毒的进入与复制

摘要

内质网伴侣蛋白机制参与病毒感染的多个阶段，从病毒进入细胞到病毒组装及释放。然而，内质网中的质量控制机制究竟如何影响细胞对日本脑炎病毒（JEV）的易感性，目前尚不清楚。在本研究中，我们发现内质网驻留的伴侣蛋白钙网蛋白（CALR）是促进细胞对JEV感染易感性的关键宿主因子。通过CRISPR/Cas9技术敲除CALR后，JEV的附着、内化以及有效复制均显著减少。从机制上来看，CALR的缺失会打破N-连接糖基化的稳态，并通过依赖内质网糖链的成熟检查点，选择性地降低整合素亚基ITGA3的浓度。糖组学分析显示未成熟的N-糖链前体积累，表明N-糖蛋白的成熟过程受到干扰。同时，CALR缺乏还会显著降低病毒包膜（E）糖蛋白的浓度，这表明CALR在决定宿主细胞的易感性以及支持病毒糖蛋白合成方面发挥着双重作用。综上所述，CALR是调控有利于病毒复制的内质网糖蛋白成熟状态的核心因子，它既有助于ITGA3介导的细胞黏附，又能促进病毒E蛋白的有效合成，从而为JEV的复制提供条件。我们的研究结果指出，钙网蛋白/钙连蛋白（CANX/CALR）调控的N-糖基化途径可能是抗病毒策略中值得关注的宿主定向靶点。